| 水稻密码子优化的cry2A^＊基因在大肠杆菌中的表达及其表达产物的纯化 |
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| 引用本文： | 秦伟,黄昆仑,贺晓云,李欣,许文涛,林希瑾,罗云波.水稻密码子优化的cry2A^＊基因在大肠杆菌中的表达及其表达产物的纯化[J].食品科学,2008,29(7):267. |
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| 作者姓名： | 秦伟 黄昆仑 贺晓云 李欣 许文涛 林希瑾 罗云波 |
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| 作者单位： | 中国农业大学食品科学与营养工程学院食品生物技术实验室,北京,100083 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)
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引进国际先进农业科技计划(948计划) |
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| 摘 要： | 通过PCR从克隆载体puC18-3Z/Cry2A*上扩增水稻偏爱型密码子优化的抗虫基因cry2A*,经限制性内切酶Nde I和BamH I双酶切定向插入到原核表达载体pET-28a( ),成功构建了在表达蛋白的N端只带有6个组氨酸标签的融合蛋白表达载体pET-28a( )/Cry2A*,并转入人肠杆菌BL21(DE3)中.通过对其表达条件进行优化,发现在IPTG浓度为0.05mmol/L、诱导时问为3h、诱导温度为20℃的表达条件下目的蛋白大部分以可溶形式进行表达.采用Ni-NTA亲和柱纯化得到高纯度目的蛋白,薄层扫描分析蛋白纯度达到95%.
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| 关 键 词： | 抗虫基因 cry2A* 转基因水稻 表达 纯化 水稻 密码子优化 抗虫基因 大肠杆菌 表达条件 柱纯化 Codon Rice Expression Proteins Purification Escherichia coli 扫描分析 薄层 高纯度 可溶 融合蛋白表达载体 诱导温度 浓度 IPTG |
Expression of Rice Codon Optimized cry2A* Gene in Escherichia coli and Purification of Its Expressed Proteins |
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| QIN Wei,HUANG Kun-lun,HE Xiao-yun,LI Xin,XU Wen-tao,LIN Xi-jin,LUO Yun-bo.Expression of Rice Codon Optimized cry2A* Gene in Escherichia coli and Purification of Its Expressed Proteins[J].Food Science,2008,29(7):267. |
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| Authors: | QIN Wei HUANG Kun-lun HE Xiao-yun LI Xin XU Wen-tao LIN Xi-jin LUO Yun-bo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | insecticidal gene cry2A* transgenic rice expression purification |
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