TLR介导BCG和猪苓多糖激活巨噬细胞株J774 NF-κB的表达

目的通过观察BCG和猪苓多糖作用后的巨噬细胞株J774免疫分子的表达，探讨猪苓多糖协同BCG启动非特异性免疫反应机制和可能的激活途径。方法应用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜，定量和定性分析体外猪苓多糖协同BCG与巨噬细胞株J774相互作用后，TLR和CD14分子的表达及NF-κB在巨噬细胞中表达的核／浆荧光强度比。结果J774细胞在BCG和猪苓多糖作用后表达TLR4，而不表达TLR2。TLR4的表达在3h出现谷值，6h达峰值，之后迅速下降，到24h～48h时再缓慢上升。BCG加猪苓多糖组TLR4的表达高于BCG组（P〈0．05）。CD14的表达也是6h达峰值，随后缓慢下降，BCG加猪苓多糖组作用24h观察，CD14的表达都高于BCG组（P〈0．05）。NF-κB的表达细胞浆和胞核在3～6h几乎同步达到峰值，之后下降。BCG组、PPS组及BCG＋PPS组细胞核／浆荧光强度比均在6h处出现谷值，而在12h处出现一个峰值，随后下降。而PPS组及BCG＋PPS组在12～24h缓慢下降，同BCG组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。各实验组细胞的核／浆荧光强度比（Fc／Fn）增大，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论猪苓多糖能协同BCG，通过TLR4与CD14一起将胞外信号转导至胞内，从而使NF-κB迅速从胞浆移位到胞核，调节相应靶基因的表达。