猪骨髓间充质干细胞分离培养及生物学特性 |
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引用本文: | 高健,梁桂金,朴英姬,李方正,张文平,宋学雄. 猪骨髓间充质干细胞分离培养及生物学特性[J]. 中国兽医学报, 2013, 33(5) |
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作者姓名: | 高健 梁桂金 朴英姬 李方正 张文平 宋学雄 |
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作者单位: | 青岛农业大学动物科技学院,山东青岛,266109 |
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基金项目: | 国家转基因生物新品种培育重大专项课题 |
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摘 要: | 采集健康猪股骨骨髓,利用percoll梯度离心法分离单个核细胞,进行体外原代和传代培养,并用不同代数细胞进行了细胞生长能力、膜表面抗原(CD105、CD90、CD45)及诱导分化能力的检测.结果显示分离培养的单个核细胞贴壁生长,形态呈成纤维细胞样及涡旋状克隆团;细胞传代至第17代生长状况仍然良好;用F3代细胞进行膜表面抗原标记显示,CD90和CD105阳性表达率分别为(97.4±1.8)%和(99.6±0.9)%,而CD45阳性表达率仅为(1.8±0.55)%,证实这些细胞具有猪骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem Cells,MSCs)表面抗原;经地塞米松、维生素C和β-磷酸甘油等诱导F3代细胞,21d后出现钙物质沉积细胞群,用茜素红和Von kossa染色呈阳性,证实这些细胞已分化形成成骨细胞;经地塞米松、IBMX、胰岛素及吲哚美辛等诱导F3代细胞,21d后细胞质出现脂滴样结构,用油红O染色呈阳性,证实已分化形成成脂细胞;冷冻-解冻细胞的膜表面抗原及多能分化能力与未冻存细胞的检测结果基本一致.结果证实,从猪骨髓中分离培养及经传代扩增获得的贴壁细胞是纯化的MSCs.
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关 键 词: | 猪 骨髓间充质干细胞 膜表面抗原 诱导分化 |
Isolation, culture and biological properties analysis of mesenchymal stem cells from porcine bone marrow |
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Abstract: | |
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Keywords: | porcine mesenchymal stem cells membrane surface antigen induced differentiation |
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