| β-淀粉样蛋白真核表达质粒的构建及鉴定 |
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| 作者姓名： | 王烈峰 汪华侨 张革 邹俊涛 徐杰 姚志彬 |
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| 作者单位： | 赣南师范学院化学与生命科学系,赣州,341000;中山大学基础医学院解剖学教研室,广州,510080;中山大学药学院,广州,510080 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目;国家重点基础研究发展计划(973计划);粤港关键领域重点突破项目;广东省自然科学基金;广东省博士启动基金;广东省社会发展专项基金 |
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| 摘 要： | 目的构建β-淀粉样蛋白真核表达质粒,为进一步开展老年性痴呆DNA疫苗的保护性研究打下基础。方法提取Tg2576转基因鼠基因组DNA,PCR扩增β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)基因,用限制性内切酶KpnⅠ/XhoⅠ分别对扩增产物和真核表达质粒pcDNA3.1酶切,将目的基因定向克隆到pcDNA3.1载体上;对重组质粒进行双酶切初步鉴定后进行序列测定。结果特异扩增出Aβ1-42片段,大小为126bp,片段成功插入pcDNA3.1载体中。经双酶切及序列测定结果表明Aβ1-42目的基因正确重组入pcDNA3.1载体中。结论成功构建Aβ1-42真核表达质粒。
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| 关 键 词： | β-淀粉样蛋白 DNA重组 序列测定 Tg2576转基因鼠 |
| 收稿时间： | 2005-06-20 |
| 修稿时间： | 2005-06-20 |
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