| 多肽配基亲和吸附介质的配基密度控制规律 |
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| 引用本文： | 张海龙,乔昕,姚红娟,郑春杨,苏志国.多肽配基亲和吸附介质的配基密度控制规律[J].化学反应工程与工艺,2007,23(4):289-295. |
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| 作者姓名： | 张海龙 乔昕 姚红娟 郑春杨 苏志国 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京,100080
2. 国家生化工程过程技术研究中心,北京,100080 |
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| 摘 要： | 以谷胱甘肽为配基,琼脂糖微球为骨架,探索将谷胱甘肽通过共价键偶联到琼脂糖微球骨架上,制备可以分离谷胱甘肽S转移酶(Glutathione S-transferase, GST)及以其为标签的融合蛋白的亲和吸附介质.采用正交实验方法考察了谷胱甘肽加入量、偶联缓冲液的pH值和反应温度对亲和介质配基密度的影响.结果发现,该反应过程中的pH值对配基密度影响最大,其次为谷胱甘肽的加入量.用所制备的亲和吸附介质纯化GST(大鼠肝脏谷胱甘肽S转移酶),发现GST的吸附量随配基密度增加而增加,但GST活性却随配基密度的增加而下降,较好的干胶配基密度为260 μmol/g.大鼠肝匀浆液经过离子交换和亲和层析两个步骤,获得了电泳纯的GST,比活力为12.08 U/mg,总活性回收率为40%以上.
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| 关 键 词： | 亲和吸附介质 琼脂糖 配基密度 谷胱甘肽 肽配基 亲和吸附 亲和介质 密度 控制规律 Density Ligand Controllable Media Affinity Chromatography 活性回收率 比活力 电泳 亲和层析 离子交换 浆液 大鼠肝脏 干胶 吸附量 纯化 |
| 文章编号： | 1001-7631（2007）04-0289-07 |
| 修稿时间： | 2007-04-18 |
Synthesis of Peptide-Ligand Affinity Chromatography Media with Controllable Ligand Density |
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| Zhang Hailong,Qiao Xin,Yao Hongjuan,Zheng Chunyang,Su Zhiguo.Synthesis of Peptide-Ligand Affinity Chromatography Media with Controllable Ligand Density[J].Chemical Reaction Engineering and Technology,2007,23(4):289-295. |
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| Authors: | Zhang Hailong Qiao Xin Yao Hongjuan Zheng Chunyang Su Zhiguo |
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| Affiliation: | 1. State Key Laboratory of Biochemical Engineering, Institute of Process Engineering, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100080, PR China; 2. National Engineering Research Center For Biotechnology (Beijing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | affinity absorbent agarose ligand density glutathione |
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