| 大鼠肝卵圆细胞的诱导、分离及鉴定 |
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| 引用本文： | 张金卷,杜智,李涛,朱争艳,王毅军,聂福华,宋继昌.大鼠肝卵圆细胞的诱导、分离及鉴定[J].生物医学工程与临床,2004,8(4):196-199,F002. |
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| 作者姓名： | 张金卷 杜智 李涛 朱争艳 王毅军 聂福华 宋继昌 |
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| 作者单位： | 天津市第三中心医院肝胆外科,卫生部人工细胞工程技术研究中心,天津,300170 |
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| 基金项目： | 国家“十五”，863资助课题(2001AA216051) |
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| 摘 要： | 目的建立大鼠肝卵圆细胞的增殖模型,并探索其分离及鉴定方法。方法雄性Wistar大鼠每天1次连续灌胃给予不同剂量二乙酰氨基芴(2-AAF熏5、10、15、20、25mg/kgBW),第5天行标准的2/3肝切除术,术后按各自剂量继续给予11天,不同时间取肝脏组织,行甲胎蛋白、细胞角蛋白18及19染色并观察。以确定的2-AAF最佳剂量制备大鼠肝干细胞增殖模型,Seglen胶原酶原位灌注结合Percoll密度梯度离心分离纯化大鼠肝卵圆细胞,光镜、电镜下观察细胞特点,并进行上述细胞表型标志免疫组化染色。结果2-AAF15mg/kgBW能建立较理想的肝卵圆细胞增殖模型。HE染色可见汇管区及中央静脉周围大量增殖的嗜碱性小细胞,电镜下观察此种细胞具有卵圆形细胞核、细胞质少而淡、核/浆比例较大等特点,免疫组化染色证实甲胎蛋白、细胞角蛋白18和19染色阳性,白蛋白及白细胞共同抗原(LCA)染色阴性。分离所得底层细胞,光镜下表现大小不等、不规则圆形细胞,体积较小,细胞核/浆比例较大,电镜下细胞表面可见少量短而小的微绒毛状突起,余同增殖细胞特点,免疫组化染色与增殖细胞表现相同细胞表型特点。结论本方法可成功诱导、分离、纯化大鼠肝卵圆细胞,符合肝卵圆细胞的形态特点、超微结构及细胞表型标志特点。
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| 关 键 词： | 肝干细胞 肝卵圆细胞 细胞分离 细胞鉴定 |
| 文章编号： | 1009-7090(2004)04-0196-04 |
Isolation and Identification of Rat Liver Stem Cells |
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| ZHANG Jin-juan,DU Zhi,LI Tao,ZHU Zheng-yan,WANG Yi-jun,NIE Fu-hua,SONG Ji-chang.Isolation and Identification of Rat Liver Stem Cells[J].Biomedical Engineering and Clinical Medicine,2004,8(4):196-199,F002. |
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| Authors: | ZHANG Jin-juan DU Zhi LI Tao ZHU Zheng-yan WANG Yi-jun NIE Fu-hua SONG Ji-chang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatic stem cell hepatic oval cell cell isolation cell identification |
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