| 人BPI活性片段基因真核表达载体的构建及其在COS-7 细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 刘家云,于文彬,马越云,范金水,丁振若,苏明权,陈云春. 人BPI活性片段基因真核表达载体的构建及其在COS-7 细胞中的表达[J]. 医学争鸣, 2000, 21(4): S41-S45 |
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| 作者姓名： | 刘家云 于文彬 马越云 范金水 丁振若 苏明权 陈云春 |
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| 作者单位： | 第四军医大学西京医院临床分子生物学研究中心,陕西,西安,710033 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，39800154， |
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| 摘 要： | 目的构建人杀菌/通透性增加蛋白(BPI)N端活性片段cDNA序列的真核表达载体并了解其在COS-7细胞中的表达. 方法提取人外周血多形核白细胞(PMN)总 RNA进行逆转录反应,经套式PCR扩增出BPI N端基因片段,将其克隆入pUC19载体中并进行酶切鉴定和序列测定,然后亚克隆入质粒pcDNA3构建真核表达载体pcDNA-BPI;重组载体通过脂质体转染 COS-7细胞,免疫荧光法鉴定BPI的表达. 结果酶切鉴定和序列分析证实重组质粒含有包括信号肽在内的BPI活性片段编码序列,转染实验表明重组质粒能在COS-7中表达出具有活性的 BPI片段. 结论 BPI活性片段真核表达载体构建及表达成功,为下一步BPI功能的研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 杀菌/通透性增加蛋白 逆转录PCR 序列分析 基因重组 真核表达 |
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Construction of eucaryotic expression vector of bioactive fragment gene of human bactericidal/permeability-increasing protein and its expression in COS-7 cells |
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| LIU Jia-Yun,YU Wen-Bin,MA Yue-Yun,FAN Jin-Shui,DING Zhen-Ruo,SU Ming-Quan,CHEN Yun-Chun. Construction of eucaryotic expression vector of bioactive fragment gene of human bactericidal/permeability-increasing protein and its expression in COS-7 cells[J]. Negative, 2000, 21(4): S41-S45 |
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| Authors: | LIU Jia-Yun YU Wen-Bin MA Yue-Yun FAN Jin-Shui DING Zhen-Ruo SU Ming-Quan CHEN Yun-Chun |
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