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| 氯硝柳胺对光滑双脐螺氧化磷酸化的影响 | |
| 作者姓名： | 张苏阳 邢云天 袁轩 曲国立 姚甲凯 戴建荣 |
| 作者单位： | 江苏省血吸虫病防治研究所国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室 |
| 基金项目： | 国家重点研发计划（2020YFC1200100）~~； |
| 摘 要： | 目的 研究氯硝柳胺对光滑双脐螺氧化磷酸化的影响，探讨氯硝柳胺的杀螺机制。方法 用线粒体提取试剂盒提取光滑双脐螺成螺线粒体，考马斯蓝染色法检测提取线粒体蛋白含量，用线粒体复合体Ⅳ活性检测试剂盒检测提取过程中组织破碎液、丢弃上清和线粒体悬液中复合体Ⅳ活性以评价提取线粒体的纯度。用线粒体复合物活性检测试剂盒提取光滑双脐螺的线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ，每种复合物各分成0.2μg/ml、1.0μg/ml组和二甲基亚砜(DMSO)组，分别加入终浓度为0.2和1.0μg/ml的氯硝柳胺、0.5%DMSO，分别测定不同波长处的吸光度(A值)，计算复合体的活力值。在96孔板中每孔加入蛋白浓度为33μg/ml的线粒体悬液，分别加入终浓度为0.2和1.0μg/ml的氯硝柳胺(0.2μg/ml组和1.0μg/ml组)或0.5%DMSO (DMSO组)，测定25℃条件下10、20、30 min的A520值，计算线粒体膜通透性转运孔(m PTP)开放度。在96孔板中每孔加入含终浓度为5μg/ml的JC-1染料、蛋白浓度为0.1 mg/ml的线粒体悬液，0.2、0.4、0.6、0.8、1.... |
| 关 键 词： | 光滑双脐螺 氯硝柳胺 线粒体膜电位 氧化磷酸化 |
