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弓形虫MIC1蛋白在杆状病毒系统中的表达及活性分析
引用本文:李响,张小涵,李美琪,陈冉,冯颖,李林,桑晓宇,杨娜.弓形虫MIC1蛋白在杆状病毒系统中的表达及活性分析[J].华中农业大学学报,2024,43(1):210-218.
作者姓名:李响  张小涵  李美琪  陈冉  冯颖  李林  桑晓宇  杨娜
作者单位:1.沈阳农业大学动物科学与医学学院/重要家畜疫病研究教育部重点实验室,沈阳 110866;2.辽宁成大生物股份有限公司,沈阳 110179
基金项目:国家自然科学基金项目(31902297;31672546;32072891);辽宁省教育厅项目(LJKZ0673;LSNQN202003);沈阳市中青年科技创新人才支持计划项目(RC 210291)
摘    要:为构建可溶性表达弓形虫MIC1蛋白质的重组杆状病毒株并分析重组蛋白质的活性,通过PCR扩增弓形虫mic1基因的编码序列并连接到pFastBac 1质粒中,将重组的转移质粒转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒,转染Sf9细胞后连续培养3代获得重组杆状病毒株。结果显示,Sf9细胞在感染后的第3天出现典型的细胞病变;间接免疫荧光和Western blot试验结果表明MIC1重组蛋白质在感染的Sf9细胞中成功可溶性表达;纯化的MIC1重组蛋白质不仅具有结合唾液酸乳糖的能力,同时能够刺激Balb/c小鼠产生较高水平的特异性抗体(>1∶25 600)。以上结果表明,通过杆状病毒表达系统可获得具有生物学活性的弓形虫MIC1重组蛋白质。

关 键 词:弓形虫  MIC1蛋白  杆状病毒系统  活性分析
收稿时间:2023/4/18 0:00:00

Purification and activity analysis of Toxoplasma gondii MIC1 protein expressed in baculovirus system
LI Xiang,ZHANG Xiaohan,LI Meiqi,CHEN Ran,FENG Ying,LI Lin,SANG Xiaoyu,YANG Na.Purification and activity analysis of Toxoplasma gondii MIC1 protein expressed in baculovirus system[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2024,43(1):210-218.
Authors:LI Xiang  ZHANG Xiaohan  LI Meiqi  CHEN Ran  FENG Ying  LI Lin  SANG Xiaoyu  YANG Na
Abstract:
Keywords:Toxoplasma gondii  MIC1 protein  baculovirus system  activity analysis
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