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粉葛PtCHI基因的克隆、原核表达和亚细胞定位
引用本文:羽健宾,郭丽君,张 静,肖 冬,何龙飞,王爱勤.粉葛PtCHI基因的克隆、原核表达和亚细胞定位[J].广西植物,2023,43(2):315-326.
作者姓名:羽健宾  郭丽君  张 静  肖 冬  何龙飞  王爱勤
作者单位:1. 广西大学 农学院, 南宁 530004; 2. 华南农业大学 生命科学学院, 广州 510642
基金项目:国家自然科学基金(81860670); 国家现代农业产业技术体系-广西薯类创新团队首席专家项目(nycytxgxcxtd-11-01)。
摘    要:为探究葛根品种间异黄酮类物质代谢关键酶基因PtCHI的分子机制差异,并揭示其品种间异黄酮物质含量差异的原因,该研究以野葛品种‘桂葛8号’和粉葛品种‘桂葛1号’为材料,经乙醇提取并通过高效液相色谱仪对野葛和粉葛中葛根素和总黄酮的含量进行测定,基于已报道的野葛CHI基因,通过同源克隆方法分离粉葛中PtCHI基因,并在体外进行蛋白表达,同时在拟南芥原生质体中研究PtCHI基因的定位。结果表明:(1)野葛中的葛根素含量显著高于粉葛的,野葛的总黄酮含量也高于粉葛但未达到显著水平。(2)成功分离到粉葛PtCHI基因,长度为742 bp且包含672 bp完整的ORF框,编码223个氨基酸,与野葛的CHI基因具有99%的同源性。(3)CHI基因在粉葛中的表达量为茎>根>叶子,在野葛中则为根>茎>叶子,除叶子外野葛中CHI基因的表达量均显著高于粉葛。(4)经预测,粉葛PtCHI蛋白为稳定的亲水性蛋白且大小为27.8 kD,二、三级结构以α-螺旋为主,具有25个磷酸化位点,与野葛、大豆和乌拉尔甘草的亲缘关系较近,与F3H2、F3H、4CL4、DFR2及CHS发生互作的可能性较大。(...

关 键 词:粉葛  PtCHI  克隆  原核表达  亚细胞定位
收稿时间:2022/4/29 0:00:00

Cloning, prokaryotic expression and subcellular localization of PtCHI gene from Pueraria montana var. thomsonii
YU Jianbin,GUO Lijun,ZHANG Jing,XIAO Dong,HE Longfei,WANG Aiqin.Cloning, prokaryotic expression and subcellular localization of PtCHI gene from Pueraria montana var. thomsonii [J].Guihaia,2023,43(2):315-326.
Authors:YU Jianbin  GUO Lijun  ZHANG Jing  XIAO Dong  HE Longfei  WANG Aiqin
Affiliation:1. College of Agriculture, Guangxi University, Nanning 530004, China; 2. College of Life Sciences, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China
Abstract:
Keywords:Pueraria montana var  thomsonii  PtCHI  cloning  prokaryotic expression  subcellular localization
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