| 靶向Nrf2基因shRNA慢病毒载体的构建及其对肝星状细胞Nrf2基因表达的沉默 |
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| 引用本文： | 李菁华,刘震雄,赵曙光,张哲,闻勤生,王景杰,张明鑫.靶向Nrf2基因shRNA慢病毒载体的构建及其对肝星状细胞Nrf2基因表达的沉默[J].山西医科大学学报,2015(1). |
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| 作者姓名： | 李菁华 刘震雄 赵曙光 张哲 闻勤生 王景杰 张明鑫 |
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| 作者单位： | 第四军医大学消化内科,西安,710038 |
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| 摘 要： | 目的：设计以NF-E2-related factor2(Nrf2)基因为靶点的短发夹状RNA(shRNA),构建重组慢病毒表达载体并转染大鼠肝星状细胞株HSC-T6,观察其对Nrf2表达的影响。方法应用重组DNA技术,将设计好的4条基因特异性shRNA序列插至慢病毒表达载体pGLV3-GFP中,构建pGLV3-GFP-Nrf2-shRNA-1/2/3/4,并应用脂质体法转染293T细胞,进行病毒包装及滴度测定。采用实时荧光定量PCR( RT-PCR)及Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测转染72 h和96 h后大鼠肝星状细胞株HSC-T6 Nrf2基因的表达情况。结果测序证实慢病毒载体构建成功,并测定滴度为1×109 TU/ml,pGLV3-GFP-Nrf2-shRNA转染后72 h和96 h可抑制Nrf2基因mRNA及蛋白的表达。结论成功构建Nrf2基因的shRNA慢病毒载体,可有效抑制大鼠肝星状细胞株HSC-T6中Nrf2基因的表达。
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| 关 键 词： | Nrf2 短发夹状RNA 慢病毒载体 HSC-T6 |
Construction of short hairpin RNA lentiviral vector targeting Nrf2 gene and its silencing effect on Nrf2 gene in HSC-T6 cells |
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| LI Jinghua,LIU Zhenxiong,ZHAO Shuguang,ZHANG Zhe,WEN Qinsheng,WANG Jingjie,ZHANG Mingxin?.Construction of short hairpin RNA lentiviral vector targeting Nrf2 gene and its silencing effect on Nrf2 gene in HSC-T6 cells[J].Journal of Shanxi Medical University,2015(1). |
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| Authors: | LI Jinghua LIU Zhenxiong ZHAO Shuguang ZHANG Zhe WEN Qinsheng WANG Jingjie ZHANG Mingxin? |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Nrf2 short hairpin RNA lentiviral vector HSC-T6 cells |
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