| 携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 曹江,陈翀,徐开林,潘秀英,李振宇,曾令宇. 携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体的构建及表达[J]. 四川大学学报(医学版), 2009, 40(2) |
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| 作者姓名： | 曹江 陈翀 徐开林 潘秀英 李振宇 曾令宇 |
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| 作者单位： | 徐州医学院附属医院,血液科,徐州,221002;徐州医学院附属医院,血液科,徐州,221002;徐州医学院附属医院,血液科,徐州,221002;徐州医学院附属医院,血液科,徐州,221002;徐州医学院附属医院,血液科,徐州,221002;徐州医学院附属医院,血液科,徐州,221002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，江苏省自然科学基金创新人才项目，江苏省普通高校研究生科研创新计划 |
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| 摘 要： | 目的 构建携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体,并研究其在CD4+CD25-T细胞中的表达.方法 构建含鼠Foxp3基因及内部核糖体进入位点序列(IRES)和绿色荧光蛋白基因(GFP)的双顺反子慢病毒载体.采用脂染法将慢病毒载体三质粒转染293T细胞,经共培养法感染免疫磁珠分离的小鼠CD4+CD25-T细胞,流式细胞术(FCM)检测基因转导效率,通过RT-PCR及Western Blotting法分别从mRNA和蛋白水平检测Foxp3的表达.结果 成功构建了慢病毒表达质粒pXZ208-IRES-GFP/pXZ208-Foxp3-IRES-GFP,包装的重组慢病毒滴度达106 IU/mL.以pXZ208-IRES-GFP为阴性对照组,共培养法感染CD4+CD25-T细胞,实验组细胞基因转导效率达55.95%,并且存在Foxp3 mRNA和蛋白水平的高表达.结论 成功构建了携带鼠Foxp3基因的自身失活型慢病毒载体;该系统可有效的介导Foxp3基因在CD4+CD25-T细胞中表达.
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| 关 键 词： | 慢病毒 Foxp3 调节性T细胞 |
Construction and Expression of the Self-inactivating Lentiviral Vector Containing Murine Foxp3 Gene |
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| CAO Jiang,CHEN Chong,XU Kai-lin,PAN Xiu-ying,LI Zhen-yu,ZENG Ling-yu. Construction and Expression of the Self-inactivating Lentiviral Vector Containing Murine Foxp3 Gene[J]. Journal of Sichuan University. Medical science edition, 2009, 40(2) |
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| Authors: | CAO Jiang CHEN Chong XU Kai-lin PAN Xiu-ying LI Zhen-yu ZENG Ling-yu |
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| Keywords: | Foxp3 |
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