二维液相色谱(SCX/RP)系统的构建及对珠蛋白水解产物的研究 |
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引用本文: | 王智聪,张庆合,李彤,赵中一,张维冰.二维液相色谱(SCX/RP)系统的构建及对珠蛋白水解产物的研究[J].中国科学B辑,2006,36(1):64-70. |
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作者姓名: | 王智聪 张庆合 李彤 赵中一 张维冰 |
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作者单位: | 1. 中国科学院大连化学物理研究所,国家色谱中心,大连,116023;中国地质大学材料与化学工程学院,武汉,430074 2. 大连依利特分析仪器有限公司,大连,116011;中国地质大学材料与化学工程学院,武汉,430074 3. 大连依利特分析仪器有限公司,大连,116011 4. 中国地质大学材料与化学工程学院,武汉,430074 5. 中国科学院大连化学物理研究所,国家色谱中心,大连,116023 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(批准号:20375040),国家重点基础研究发展规划(973)项目(批准号:001CB510202),“十五”国家科技攻关重大项目(批准号:2001BA210A01)资助 |
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摘 要: | 以十通阀为切换接口, 构建了SCX/RP常规柱二维液相色谱系统, 并以珠蛋白水解产物的分析对其加以评价. 样品首先由第一维阳离子交换色谱(Hypersil SCX, 100 mm×4.6 mm I.D.)在pH 4.0的磷酸盐缓冲体系中分离, 洗脱产物进入切换接口, 样品组分被富集在捕集柱(Hypersil BDS C18, 15 mm×4.6 mm I.D.)中, 进一步脱盐后被导入第二维反相色谱(Hypersil BDS C18, 250 mm×4.6 mm I.D.)分离分析. 阳离子交换色谱采用逐步增加盐浓度的12步台阶等度间断方式洗脱, 每次将洗脱产物捕集在捕集柱中进而由反相色谱分析, 实现对第一维洗脱产物的切割转移及第二维分析. 与一维色谱相比, 二维液相色谱系统的分辨率、峰容量也得到提高, 系统峰容量达到2280.
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关 键 词: | 二维液相色谱 接口 捕集柱 蛋白质组 珠蛋白 |
收稿时间: | 2004-10-15 |
修稿时间: | 2004年10月15 |
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