| 猪星状病毒4型SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立 |
| |
| 引用本文： | 陈少杰,刘立辉,吴志勇,肖娜,袁广富,王晶,邢亚茹,刘如月,范京惠,左玉柱.猪星状病毒4型SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J].畜牧兽医学报,2020,51(2):404-408. |
| |
| 作者姓名： | 陈少杰 刘立辉 吴志勇 肖娜 袁广富 王晶 邢亚茹 刘如月 范京惠 左玉柱 |
| |
| 作者单位： | 1. 河北农业大学动物医学院, 保定 071001;2. 定州市农业农村局, 定州 073000;3. 邯郸市畜牧技术推广站, 邯郸 056000 |
| |
| 基金项目： | 河北省重点研发计划项目（19226622D）；河北省农业产业技术体系生猪创新团队（HBCT2018110207） |
| |
| 摘 要： | 为建立一种快速检测猪星状病毒4型(PAstV4)的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法,根据已知的猪星状病毒4型序列的ORF1a基因设计了特异性引物,并将扩增片段克隆到pMD19-T载体上;将构建的重组质粒作为标准品建立SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法,并对建立方法的灵敏性、特异性及重复性进行验证。结果显示,建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法最低检测量为50.3拷贝·μL-1,其灵敏度是普通PCR的100倍;与CSFV、PRRSV、PRV、PEDV、PDCoV无交叉反应,特异性较好;建立的标准曲线呈良好的线性关系,相关系数R2=1.00。应用该方法检测了2018-2019年收集的43份临床样品,阳性率为18.6%。本研究为猪星状病毒4型的临床检测建立了一种快速、灵敏、特异性强的方法。
|
| 关 键 词： | 猪星状病毒 荧光定量 SYBR GreenⅠ |
| 收稿时间： | 2019-09-19 |
| 本文献已被 维普 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《畜牧兽医学报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《畜牧兽医学报》下载全文 |
|
