TNF-α刺激大鼠骨髓间充质干细胞的机制研究 |
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作者姓名: | 彭程飞 韩雅玲 邓捷 闫承慧 康建 李洋 李杰 王艳春 |
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作者单位: | [1]第四军医大学西京医院,陕西西安710032 [2]沈阳军区总医院,辽宁沈阳110016 [3]辽宁省中医药学院,辽宁沈阳110016 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(30770793 30971218 81070097); 国家青年科学基金项目(30800465) |
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摘 要: | 目的:研究肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激大鼠骨髓间充质干细胞(marrow-derived mesenchymalstem cells,MSCs)的作用机制。方法:采取大鼠骨髓,以密度梯度离心分离出单个核细胞(MNCs),于体外培养并由牛垂体提取物(PEX)诱导扩增传代培养出骨髓间充质干细胞(MSCs)。经形态学和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定后,用TNF-α刺激骨髓间充质干细胞(MSCs),通过酶联免疫吸附剂测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)观察比较不同组别细胞的生长因子分泌和蛋白印迹法(western blot)来观察细胞中蛋白的变化。结果:①经形态学观察和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定,提示骨髓间充质干细胞的培养成功。②无TNF-α刺激组与TNF-α刺激组比较,TNF-α刺激组的生长因子分泌显著性增加,而通过磷酸化IκB的表达量显著性增加提示NF-κB被激活(P〈0.05);同时TNF-α刺激组与TNF-α+NF-κB抑制剂组比较,TNF-α+NF-κB抑制剂组的生长因子分泌显著降低,而通过磷酸化IκB的表达量显著减少提示NF-κB的活性被抑制(P〈0.05)。结论:NF-κB对TNF-α刺激下的骨髓间充质干细胞分泌生长因子有关键性作用。
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关 键 词: | 骨髓间充质干细胞 肿瘤坏死因子-α 核转录因子-κB 生长因子 |
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