重组单链Fv段融合TNFα(mscFv25-TNFα)的导向治疗

目的 希望能得到具有临床应用价值的抗肝癌重组单链Ｆv段－免疫毒素。方法 将抗肝癌重组单链Ｆv段－免疫毒素mscFv25-TNFα在大肠杆菌ＪＭ１０９中以ＩＰＴＧ诱导进行表达。将包涵体形式的表达与产物溶解和折叠后，以GST亲合层析色谱纯化。用间接免疫荧光染色测定纯化后目的蛋白的活性。MTT试验鉴定 mscFv25-TNFα对靶细胞SMMC－7721的杀伤活性。通过对荷肝癌（SMMC－7721）裸鼠进行体内初步抑瘤实验。检测mscFv25-TNFα的导向治疗的效果。结果 纯化的目的蛋白间接免疫荧光染色呈阳性，MTT实验提示，在放线菌素D存在的情况下，体外mscFv25-TNFα对靶细胞SMMC－7721具有细胞毒作用。实验组14只裸鼠中4只的移植瘤的生长完全得到抑制，而TNFα对照组无完缓解。结论 间接免疫荧光染色表明，mscFv25-TNFα的特异性和亲和力与亲本抗体HBb25相比较没有明显下降。荷肝癌裸鼠体内的抑瘤实验显示，mscFv25-TNFα对荷肝癌裸鼠体内直径2－4mm左右的肿瘤具有一定的杀伤作用，初步证明mscFv25-TNFα具有一定的临床应用潜力。