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金黄色葡萄球菌重组蛋白AtlM的体外抗菌效应初步探讨
引用本文:邓燕燕,张寒,罗红,孙文平,杨光,陈晨.金黄色葡萄球菌重组蛋白AtlM的体外抗菌效应初步探讨[J].中华微生物学和免疫学杂志,2013(7).
作者姓名:邓燕燕  张寒  罗红  孙文平  杨光  陈晨
作者单位:1. 201700,上海市中山医院青浦分院检验科微生物室
2. 大连第五人民医院
3. 116044,大连医科大学临床免疫与微生物教研室
基金项目:辽宁省科技厅自然科技基金资助项目
摘    要:目的通过基因工程技术获取金黄色葡萄球菌( ATCC25923)自溶素片段AtlM重组蛋白( rAtlM),初步探讨其体外抗菌效应。方法根据GenBank 中金黄色葡萄球菌atlM基因序列( AC:D17366)设计合成特异引物,采用PCR技术扩增相应的序列并构建重组表达质粒pET-32а(+)/atlM,经由IPTG诱导后通过等电点洗脱技术获取纯化的rAtlM;采用微量肉汤稀释法测定rAtlM对ATCC25923及其苯唑西林诱导耐药株的最低抑菌浓度( minimal inhibitory concentration ,MIC);体外试验测定rAtlM对ATCC25923菌株及其耐药株的抗菌活性。结果成功构建了原核表达载体pET-32а(+)/atlM,表达的重组蛋白AtlM对ATCC25923标准株和耐药株的MIC分别为8μg/ml和64μg/ml。体外抑菌试验显示rAtlM作用于ATCC25923标准株和耐药株1 h后即对细菌生长具有抑制作用( P值分别为0.004和0.026),对标准株作用持续到5 h测定点(P=0.012),对苯唑西林耐药株作用持续到3 h测定点(P=0.001),5 h后与未加药物的对照组相比差异无统计学意义(P=0.102)。结论50μg/ml的rAtlM对金黄色葡萄球菌( ATCC25923)及苯唑西林耐药株初步显示出一定的抑菌作用,具有作为抗菌药物的可能性。

关 键 词:金黄色葡萄球菌  自溶素  抗菌药  基因表达

In vitro antibacterial activity of recombinant protein AtlM of Staphylococcal aureus
DENG Yan-yan , ZHANG Han , LUO Hong , SUN Wen-ping , YANG Guang , CHEN Chen.In vitro antibacterial activity of recombinant protein AtlM of Staphylococcal aureus[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2013(7).
Authors:DENG Yan-yan  ZHANG Han  LUO Hong  SUN Wen-ping  YANG Guang  CHEN Chen
Abstract:
Keywords:Staphylococcal aureus  Autolysin  Antimicrobial agent  Gene expression
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