人Lipocalin前列腺素D合酶的克隆表达及其抗体制备 |
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引用本文: | 苏兵,关明,吕元,赵旭东,陈常庆. 人Lipocalin前列腺素D合酶的克隆表达及其抗体制备[J]. 复旦学报(医学版), 2001, 28(4): 303-306 |
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作者姓名: | 苏兵 关明 吕元 赵旭东 陈常庆 |
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作者单位: | 1. 复旦大学附属华山医院检验科 2. 中国科学院上海生物工程研究中心 |
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基金项目: | 上海市卫生局百人计划资助课题 |
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摘 要: | 目的 研究Lipocalin型前列腺素D合酶(L-PGDS)的编码蛋白质在大肠杆菌中的表达,进一步制备抗L-PGDS编码蛋白质的多克隆抗体。方法 用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法克隆L-PGDS基因蛋白编码序列。构建该基因的表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达,SDS-PAGE分析表达的蛋白质。用RediPack GST亲和层析柱纯化的蛋白质免疫BALB/c小鼠制备多抗。结果 RT-PCR所分离的L-PGDS基因蛋白编码序列,经测序证明与基因库所报道的L-PGDS的基因序列完全一致。SDS-PAGE分析证实该基因编码的蛋白质在大肠杆菌中表达,并获得效价为1:6400的多克隆抗体。结论 L-PGDS基因编码蛋白质能够在原核细胞中表达,并能获得抗L-PGDS基因编码蛋白质的多克隆抗体,为进一步深入研究该蛋白质的结构与功能打下了基础。
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关 键 词: | 前列腺素D合酶 基因克隆 多克隆抗体 融合蛋白 L-PGDS PGD2 大肠杆菌 |
修稿时间: | 2000-12-25 |
Human Lipocalin Prostaglandin D Synthase Clone Expression and Preparation of Its Antibody |
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Abstract: | |
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Keywords: | prostaglandin d synthase gene clone polyclonal antibody fusion protein |
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