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人Lipocalin前列腺素D合酶的克隆表达及其抗体制备
引用本文:苏兵,关明,吕元,赵旭东,陈常庆. 人Lipocalin前列腺素D合酶的克隆表达及其抗体制备[J]. 复旦学报(医学版), 2001, 28(4): 303-306
作者姓名:苏兵  关明  吕元  赵旭东  陈常庆
作者单位:1. 复旦大学附属华山医院检验科
2. 中国科学院上海生物工程研究中心
基金项目:上海市卫生局百人计划资助课题
摘    要:目的 研究Lipocalin型前列腺素D合酶(L-PGDS)的编码蛋白质在大肠杆菌中的表达,进一步制备抗L-PGDS编码蛋白质的多克隆抗体。方法 用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法克隆L-PGDS基因蛋白编码序列。构建该基因的表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达,SDS-PAGE分析表达的蛋白质。用RediPack GST亲和层析柱纯化的蛋白质免疫BALB/c小鼠制备多抗。结果 RT-PCR所分离的L-PGDS基因蛋白编码序列,经测序证明与基因库所报道的L-PGDS的基因序列完全一致。SDS-PAGE分析证实该基因编码的蛋白质在大肠杆菌中表达,并获得效价为1:6400的多克隆抗体。结论 L-PGDS基因编码蛋白质能够在原核细胞中表达,并能获得抗L-PGDS基因编码蛋白质的多克隆抗体,为进一步深入研究该蛋白质的结构与功能打下了基础。

关 键 词:前列腺素D合酶 基因克隆 多克隆抗体 融合蛋白 L-PGDS PGD2 大肠杆菌
修稿时间:2000-12-25

Human Lipocalin Prostaglandin D Synthase Clone Expression and Preparation of Its Antibody
Abstract:
Keywords:prostaglandin d synthase  gene clone  polyclonal antibody  fusion protein
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