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| β-淀粉样前体蛋白第二、三外显子删除突变抑制β-淀粉样蛋白分泌 | |
| 引用本文： | 查芹芹,阮燕,刘中华,曹连元,张岱.β-淀粉样前体蛋白第二、三外显子删除突变抑制β-淀粉样蛋白分泌[J].北京大学学报(医学版),2003,35(3):261-265. |
| 作者姓名： | 查芹芹 阮燕 刘中华 曹连元 张岱 |
| 作者单位： | 1. 北京大学精神卫生研究所,北京,100083;北京回龙观医院 2. 北京大学精神卫生研究所,北京,100083 3. 北京回龙观医院 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金;39870276,39840010; |
| 摘 要： | 目的 :观察 β 淀粉样前体蛋白第二、三外显子编码结构域对培养的人神经纤维母细胞瘤细胞系 (SH SY5Y)生长代谢和 β淀粉样蛋白 (Aβ)分泌的影响。 方法 :利用重组DNA技术 ,构建 pcDNA3.1APP695和删除第二、三外显子的pcDNA3.1ΔAPP695质粒 ,用脂质体转染法将其转入SH SY5Y细胞系 ,用 0 .6 g·L-1G4 18筛选获得稳定表达外源基因的细胞系 ,采用MTT法分析对细胞增殖的影响 ,用免疫沉淀Westernblot分析细胞培养液中Aβ的含量。结果 :成功构建了APP695cDNA和删除第二、三外显子的ΔAPP695cDNA的真核表达载体 ,转染SH SY5Y细胞系后 ,Westernblot证实外源基因得到表达 ,MTT分析结果显示删除第二、三外显子的ΔAPP695cDNA未对细胞产生明显的抑制增殖作用 ,免疫沉淀Westernblot分析表明 ,与转染全长APP695cDNA细胞相比 ,转染ΔAPP695cDNA细胞Aβ分泌显著减少。 结论 :APP695第二、三外显子编码结构域删除后抑制了Aβ的生成 ,对探讨Aβ分子前体水解加工生成Aβ的关系有重要意义 |
| 关 键 词： | 阿尔茨海默病 淀粉样β蛋白前体 删除突变 |
| 文章编号： | 1671-167X(2003)03-0261-05 |
| 修稿时间： | 2003年2月24日 |
Deletion mutation of β-amyloid precursor protein decreases the secretion of β-amyloid in SH-SY5Y neuroblastoma cells |
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