| 靶向Smad4基因shRNA质粒表达载体的构建及筛选 |
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| 引用本文： | 张彩平,龙石银,田英,何云武,崔慧辉,王思远. 靶向Smad4基因shRNA质粒表达载体的构建及筛选[J]. 现代生物医学进展, 2010, 10(17) |
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| 作者姓名： | 张彩平 龙石银 田英 何云武 崔慧辉 王思远 |
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| 基金项目： | 国家自然基金青年项目资助课题，湖南省教育厅资助课题，湖南省教育厅资助课题 |
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| 摘 要： | 目的:构建编码Smad4mRNA的shRNA真核表达载体,并筛选出基因沉默效果最明显的shRNA质粒表达载体.方法:根据GenBank提供的人Smad4基因的mRNA序列构建2个shRNA质粒表达栽体和1个阴性对照质粒表达载体,并通过基因测序进行鉴定.经鉴定后转染体外培养人成纤维细胞,western-blot检测Smad4蛋白水平抑制表达效果.结果:构建质粒表达载体测序结果显示,插入片段测序结果与合成的shRNA序列一致;靶向Smad4基因shRNA质粒表达栽体对所转染的人成纤维细胞中Smad4蛋白水平表达均有抑制作用,其中shRNA1最为明显.结论:成功构建了靶向Smad4基因shRNA质粒表达栽体,其中抑制Smad4基因表达效果最为明显的是shRNA1,为进一步研究Srnad4基因的RNA干扰奠定了基础.
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| 关 键 词： | RNA干扰 Smad4基因 基因克隆 鉴定 |
Construction and screening of plasmid expression vectors encoding the short hairpin RNA targeting Smad4 gene |
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| ZHANG Cai-ping,LONG Shi-yin,TIAN Ying,HE Yun-wu,CUI Hui-hui,WANG Si-yuan. Construction and screening of plasmid expression vectors encoding the short hairpin RNA targeting Smad4 gene[J]. Progress in Modern Biomedicine, 2010, 10(17) |
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| Authors: | ZHANG Cai-ping LONG Shi-yin TIAN Ying HE Yun-wu CUI Hui-hui WANG Si-yuan |
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