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如皋黄鸡新基因LBC多抗的制备及其亚细胞定位
作者单位:;1.扬州大学动物科学技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室
摘    要:克隆如皋黄鸡LBC(Libichun)基因CDS区,通过GFP-LBC融合蛋白和间接免疫荧光法(IFA)来实现该基因的亚细胞定位,为其基因功能研究奠定基础。提取如皋黄鸡18日龄的鸡胚睾丸RNA,巢式PCR方法扩增LBC基因的CDS区,构建真核表达载体pEGFP-N1-LBC转染DF-1细胞,48h后观察其绿色荧光表达情况,同时制备LBC基因的多克隆抗体,利用IFA标记LBC基因的表达部位。本研究成功克隆出如皋黄鸡LBC基因的完整编码区,成功制备抗体和构建pEGFP-N1-LBC、pcDNA3.0-LBC。GFP-LBC融合蛋白和IFA的结果显示,如皋黄鸡LBC基因在细胞质和细胞核中都有表达,为下一步LBC基因的功能研究奠定了基础。

关 键 词:如皋黄鸡  新基因LBC  多克隆抗体制备  亚细胞定位。

Polyclonal antibody preparation and subcellular localization of a new gene LBC of Rugao yellow chicken
Abstract:
Keywords:
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