归术益坤方对多囊卵巢综合征大鼠颗粒细胞自噬通路P53/AMPK中关键基因表达的影响

目的研究归术益坤方对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞自噬通路P53/AMPK中关键基因表达的影响。方法以丙酸睾丸酮和自噬诱导剂(C2-神经酰胺)干预颗粒细胞,通过透射电镜检测颗粒细胞的自噬情况,建立大鼠PCOS颗粒细胞的自噬模型。实验分为空白组、模型组(10-5mol/L丙酸睾丸酮、10μmol/L C2-神经酰胺)、归术益坤方高、中、低剂量组(浓度分别为0.1、0.01、0.001 mg/mL)及自噬阻断剂3MA组(10 mmol/L),采用Real-time PCR法检测各组颗粒细胞中P53、mT OR、AMPK基因的表达。结果 10-5mol/L TP、10μmol/LC2-神经酰胺作用颗粒细胞24 h后,细胞超微结构中可观察到自噬小体。与模型组相比,高、中、低剂量归术益坤方可显著上调P53基因的表达(P 0.01,P 0.05),下调AMPK基因的表达(P 0.01),差异有统计学意义;与模型组相比,高、中剂量归术益坤方可显著上调mT OR基因的表达,差异有统计学意义(P 0.01)。中药低剂量组与模型组相比,差异无统计学意义(P 0.05)。结论大鼠PCOS颗粒细胞的自噬模型成功建立。归术益坤方可以通过调控P53/AMPK信号通路中关键基因的表达,来抑制自噬,这可能是归术益坤方治疗多囊卵巢综合征的新机制。