| 摘 要： | 目的探讨氯化镉(CdCl_2)对人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)线粒体功能、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子α(PGC-1α)蛋白表达的影响,以及CdCl_2致HK-2细胞线粒体氧化损伤的机制。方法体外培养HK-2细胞,以0、10、20、30、40、50和60μmol/L CdCl_2干预24 h后收集细胞,MTT法观察细胞活力;Mito SOXTM活细胞荧光染色观察线粒体中活性氧(ROS)生成情况,多功能酶标仪测定线粒体中呼吸链复合物Ⅲ活性,流式细胞仪分析线粒体膜电位变化;Western blot法检测CdCl_2对HK-2细胞总蛋白中PGC-1α表达的影响。结果与对照组相比,当CdCl_2浓度增加到20、60μmol/L作用24 h后HK-2细胞存活率下降为(77.60±0.82)%和(41.97±1.22)%(P0.01);并呈剂量依赖性引起线粒体呼吸链复合物Ⅲ的活性下降和线粒体ROS增多(P0.05),JC-1单体阳性率的比值分别为对照组的1.51、1.58、1.72、2.41和3.47倍(P0.01);而细胞总蛋白中PGC-1α蛋白的表达随氯化镉剂量的增加而减少(P0.05)。结论氯化镉可通过抑制PGC-1α蛋白表达,抑制线粒体呼吸链复合物Ⅲ的活性,促进线粒体ROS生成,诱导线粒体膜电位下降,导致对HK-2细胞的毒性损伤。
|
