| 新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究 |
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| 引用本文： | 苏锦坤,师永霞,郑夔,李小波,黄吉城,相大鹏,幸芦琴,郭波旋.新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究[J].中国卫生检验杂志,2012(5):962-965. |
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| 作者姓名： | 苏锦坤 师永霞 郑夔 李小波 黄吉城 相大鹏 幸芦琴 郭波旋 |
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| 作者单位： | 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
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| 基金项目： | 国家质检总局科技计划项目(2008IK256和2011IK128);国家质检公益项目(2007GYJ023) |
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| 摘 要： | 目的:建立新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法。方法:分析新疆出血热病毒核酸S片段序列的保守性,设计新疆出血热病毒实时荧光RT-PCR引物和探针。以体外转录后的RNA作为阳性对照模板,摸索出实时荧光RT-PCR检测的最佳引物浓度、探针浓度和反应体系条件,并进行灵敏度和特异性分析。结果:建立的新疆出血热病毒的实时荧光RT-PCR检测方法最佳反应体系为:正向引物CCHFV-FP终浓度250 nM,反向引物CCHFV-RP终浓度500 nM,探针CCHFV-Probe终浓度500 nM;扩增程序为:50℃10 min,95℃10 min;95℃5 s,57℃20 s 45次循环。该方法最低检测限约为2 copies病毒/反应,与森林脑炎病毒和汉坦病毒无交叉反应。结论:该方法灵敏度高、特异性强,适用于新疆出血热病毒的快速检测。
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| 关 键 词： | 新疆出血热病毒 实时荧光RT-PCR 检测 |
Research on Real time RT-PCR for Xinjiang hemorrhagic fever virus |
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| SU Jin-kun,SHI Yong-xia,ZHENG Kui,LI Xiao-bo,HUANG Ji-cheng,XIANG Da-peng,XING Lu-qin,GUO Bo-xuan.Research on Real time RT-PCR for Xinjiang hemorrhagic fever virus[J].Chinses Journal of Health Laboratory Technology,2012(5):962-965. |
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| Authors: | SU Jin-kun SHI Yong-xia ZHENG Kui LI Xiao-bo HUANG Ji-cheng XIANG Da-peng XING Lu-qin GUO Bo-xuan |
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| Affiliation: | (Inspection and Quarantine Technical Center,Guangdong Entry-exit Inspection and Quarantine Burea,Guangzhou 510700,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Xinjiang hemorrhagic fever virus Real time RT-PCR Detection |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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