| SPAG6基因RNAi慢病毒载体的构建及其对SKM-1细胞凋亡的影响 |
| |
| 引用本文： | 杨碧慧,张玉琳,王利,罗小华,陈礼平,杨泽松,刘林. SPAG6基因RNAi慢病毒载体的构建及其对SKM-1细胞凋亡的影响[J]. 第三军医大学学报, 2015, 37(5) |
| |
| 作者姓名： | 杨碧慧 张玉琳 王利 罗小华 陈礼平 杨泽松 刘林 |
| |
| 作者单位： | 重庆医科大学附属第一医院血液内科, 重庆,400016 |
| |
| 摘 要： | 目的 构建SPAG6-shRNA慢病毒载体靶向沉默SPAG6基因,探讨SPAG6基因沉默对人骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)细胞株SKM-1细胞增殖及凋亡的影响.方法 设计并构建3条针对SPAG6基因的shRNA质粒表达载体,共转染293T细胞后得到可表达SPAG6基因RNAi的慢病毒载体.转染SKM-1细胞,利用流式细胞术检测转染效率,qRT-PCR及Western blot验证SPAG6基因干扰效果,筛选最佳靶点.CCK-8法检测SPAG6基因沉默对SKM-1细胞生长的影响,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 成功构建SPAG6-shRNA慢病毒载体,流式细胞术检测转染效率均在60％以上.qRT-PCR及Western blot检测结果显示SPAG6-shRNA3慢病毒载体敲除效率最高,为最佳靶点.SPAG6基因干扰后,干扰组SKM-1细胞的增殖明显受抑,抑制率为(60.18 ±0.37)％,与阴性对照组相比差别有统计学意义(P＜0.05).干扰组SKM-1细胞凋亡率为(16.32±5.80)％,显著高于阴性对照组[(4.28±0.88)％,P =0.024]及空白对照组[(3.08±1.50)％,P=0.019].结论 SPAG6-shRNA慢病毒载体能有效降低SPAG6基因表达水平,抑制SKM-1细胞增殖并促进其凋亡.
|
| 关 键 词： | SPAG6基因 慢病毒 RNA干扰 骨髓增殖异常综合征 |
Construction of lentiviral vector for SPAG6 RNA interference and its influence on apoptosis of SKM-1 cells |
| |
| Yang Bihui,Zhang Yulin,Wang Li,Luo Xiaohua,Chen Liping,Yang Zesong,Liu Lin. Construction of lentiviral vector for SPAG6 RNA interference and its influence on apoptosis of SKM-1 cells[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2015, 37(5) |
| |
| Authors: | Yang Bihui Zhang Yulin Wang Li Luo Xiaohua Chen Liping Yang Zesong Liu Lin |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | SPAG6 gene lentivirus RNA interference myelodysplastic syndrome |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
