| HIV-1B′/C亚型Rev蛋白的表达、纯化与抗体制备 |
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| 作者姓名： | 齐香荣 高瑛瑛 陆柔剑 谭文杰 阮力 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,102206 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划，中国综合性国际艾滋病研究项目(CIPRA) |
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| 摘 要： | 目的:为方便实验室工作中对HIV-1 B′/C亚型Rev蛋白的检测,制备相应的Rev蛋白及其抗体.方法:将我国HIV-1 B′/C亚型流行株的rev基因按大肠杆菌优势密码子进行改造后人工合成,在原核系统中与pET30a(+)载体中的His·Tag、Trx·Tag及S·Tag进行融合表达,目的蛋白经Ni2+金属螯合层析柱纯化后用于免疫家兔,制备多克隆抗体.结果与结论:合成基因在原核系统中融合表达得到相对分子质量约18×103的融合蛋白,目的蛋白的表达量约占菌体总蛋白量的36%;用纯化后的融合蛋白免疫家兔,制备了多克隆抗体,Western印迹及间接免疫荧光检测结果显示,获得的多克隆抗体与HIV-1 B′/C亚型的Rev蛋白能产生特异性反应,可用于检测HIV-1 B′/C亚型Rev蛋白的表达.
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| 关 键 词： | Rev蛋白 原核表达 多克隆抗体 |
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