红树林土壤微生物宏基因组文库的构建及两种新颖的β-葡萄糖苷酶基因的鉴定 |
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引用本文: | 麦志茂,苏宏飞,李丽珍,张偲.红树林土壤微生物宏基因组文库的构建及两种新颖的β-葡萄糖苷酶基因的鉴定[J].生物技术通报,2014(6). |
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作者姓名: | 麦志茂 苏宏飞 李丽珍 张偲 |
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作者单位: | 中国科学院南海海洋研究所 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(“973”)(2010CB833801);国家自然科学基金重点项目(41230962) |
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摘 要: | 宏基因组技术是挖掘微生物新酶的重要途径。通过构建红树林土壤微生物Fosmid文库,共获得了约100 000个阳性克隆,该文库外源插入片段平均长度约为30 kb,文库容量达3 Gb。通过对文库中10 000个克隆进行功能筛选,获得了17个具有β-葡萄糖苷酶活性的克隆。对其中2个表达β-葡萄糖苷酶的克隆进行亚克隆,获得2个新颖的β-葡萄糖苷酶的基因,分别命名MhGH3和bgl66。生物信息学分析表明,MhGH3基因由1 992个碱基对组成,bgl66基因由2 025个碱基对组成。在氨基酸水平上,MhGH3和bgl66编码的蛋白质与GenBank数据库中已知β-葡萄糖苷酶的一致性分别为64%和55%。
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关 键 词: | β-葡萄糖苷酶 纤维素酶 红树林 宏基因组文库 |
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