鸡α干扰素在家蚕中的表达及抗病毒活性测定 |
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引用本文: | 李田田,杨灵,易咏竹,沈桂芳,张志芳,李轶女.鸡α干扰素在家蚕中的表达及抗病毒活性测定[J].生物技术通报,2014(3). |
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作者姓名: | 李田田 杨灵 易咏竹 沈桂芳 张志芳 李轶女 |
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作者单位: | 中国农业科学院生物技术研究所;河南省轻工业学校轻工工程系;中国农业科学院蚕业研究所; |
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基金项目: | 国家“863”计划资助项目(2011AA100603);国家自然科学基金资助项目(31070139) |
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摘 要: | 鸡α干扰素在防御病毒感染及治疗病毒性疾病中起着重要的作用。旨在利用家蚕杆状病毒表达系统研制有活性的鸡α干扰素。首先对鸡α干扰素基因(ChIFN-α)进行了优化与合成,将其克隆到杆状病毒转移载体pVL1393中,与ORF1629缺损的亲本病毒BmBcmid共转染,纯化重组病毒,再感染家蚕幼虫,收集蚕血淋巴以检测α干扰素基因的表达。Western blot分析结果显示,成功表达出分子量约为19 kD的鸡α干扰素。采用细胞病变抑制法在Vero-VSV*GFP系统中测定表达产物的抗病毒活性。所的表达的鸡α干扰素具有明显的抗病毒活性,活性不低于3.2×105 U/mL。利用杆状病毒载体系统成功地表达了具有抗病毒活性的鸡α干扰素的成熟蛋白,为开发廉价高效的鸡干扰素生物制剂奠定了物质基础。
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关 键 词: | 鸡α干扰素 家蚕 杆状病毒表达系统 抗病毒活性 |
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