| 禽呼肠孤病毒σC基因的克隆和表达 |
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| 作者姓名： | 黄小波 凌珊珊 曹三杰 文心田 王存伟 陈元坤 |
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| 作者单位： | 1. 四川农业大学,动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室,四川,雅安,625014
2. 四川农业大学,动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室,四川,雅安,625014;四川卧龙国家级自然保护区管理局,四川,成都,610000 |
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| 基金项目： | 教育部长江学者和创新团队发展计划 |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR技术设计扩增禽呼肠孤病毒(ARV)S1133毒株的σC基因,将扩增基因克隆至pMD-19T载体上,经PCR、酶切及测序鉴定,克隆的基因片段为ARV σC基因.将该基因重组至pET32a(+)原核表达载体上成功构建了表达裁体pET32a-σC.该重组质粒在大肠杆菌BL21中经1.0 mmol/L IPTG诱导5 h得到最佳表达.表达重组蛋白的相对分子质量为54 000,以包涵体形式存在.经Western-blot分析表明,该重组蛋白能于ARV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性.
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| 关 键 词： | 禽呼肠孤病毒 σC基因 pMD19T-σC pET32a-σC σC gene pMD19T-σC pET32a-σC |
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