| 中国明对虾线粒体MnSOD在大肠杆菌中的重组表达、产物纯化及活性测定 |
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| 引用本文： | 张庆利,李富花,黄冰心,周茜,相建海.中国明对虾线粒体MnSOD在大肠杆菌中的重组表达、产物纯化及活性测定[J].高技术通讯,2008,18(8). |
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| 作者姓名： | 张庆利 李富花 黄冰心 周茜 相建海 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院研究生院,北京,100039
2. 中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室,青岛,266071 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 采用PCR方法扩增编码中国明对虾线粒体锰超氧化物歧化酶(MnSOD)成熟肽的基因,并克隆到大肠杆菌表达载体pCRR T7/NT TOPOR TA中进行体外重组表达.重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3) pLysS后,经IPTG诱导表达产生包涵体形式的目的蛋白.对重组蛋白进行 LC-ESI-MS 分析的结果表明,融合蛋白的三个肽段与中国明对虾线粒体MnSOD 相应肽段完全一致.将重组蛋白通过金属螯合柱进行纯化,进而透析、复性,最后获得了活性高达2373U/mg的重组蛋白.中国明对虾线粒体MnSOD的成功表达,为深入研究其在中国明对虾免疫反应和抗氧化胁迫中的作用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 中国明对虾 锰超氧化物歧化酶 重组表达 纯化 活性分析 |
Recombinant expression,purification and activity analysis of Fenneropenaeus chinensis mitochondrial manganese superoxide dismutase gene in E.coil |
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| Zhang Qingli,Li Fuhua,Huang Bingxin,Zhou Qian,Xiang Jianhai.Recombinant expression,purification and activity analysis of Fenneropenaeus chinensis mitochondrial manganese superoxide dismutase gene in E.coil[J].High Technology Letters,2008,18(8). |
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| Authors: | Zhang Qingli Li Fuhua Huang Bingxin Zhou Qian Xiang Jianhai |
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| Affiliation: | Zhang Qingli~* Li Fuhua Huang Bingxin Zhou Qian~* Xiang Jianhai (Key Laboratory of Experimental Marine Institute of Oceanology,Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071)(~*Graduate University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100039) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | fenneropenaeus chinensis MnSOD recombinant expression purification activity analysis |
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