贴壁细胞超声脱壁技术研究

细胞从培养皿表层脱壁是贴壁细胞传代的必须操作，目前，胰蛋白酶消化法是细胞脱壁的主要方法，但该方法操作复杂，难以实现自动化细胞培养。此外，胰蛋白酶还会对细胞蛋白造成不可逆的伤害，造成细胞产量下降及自修复时间长等问题。超声脱壁技术使用物理手段完成细胞脱壁，可以避免损伤细胞蛋白，实现脱壁过程的自动化。该文研究了一种超声脱壁技术，采用基于亮场显微镜的细胞融合度检测方法，对超声脱壁技术的脱壁效果进行评估，以人脐带间充质干细胞为目标细胞，研究了贴壁细胞超声脱壁技术的关键控制参数。实验结果显示，当超声换能器输入电压为 255 V、超声频率为 159～161 kHz 扫频、超声时间为 2 min 时，将细胞与超声换能器距离调至 3 mm，使用 12 mL 生理盐水作为震荡液体，可以使 T75 瓶中细胞脱壁面积达到 95%，细胞成活率达到 70%。

Study on Ultrasonic Detachment of Adherent Cells