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| 猪瘟病毒荧光定量PCR标准阳性模板的构建 | |
| 引用本文： | 陆永干,戴贤君,姚建红,黄利权.猪瘟病毒荧光定量PCR标准阳性模板的构建[J].浙江农业学报,2009,21(1). |
| 作者姓名： | 陆永干 戴贤君 姚建红 黄利权 |
| 作者单位： | 1. 浙江大学,动物科学学院,浙江,杭州,310029;杭州市畜牧兽医局,浙江,杭州,310020 2. 中国计量学院,生命科学学院,浙江,杭州,310018 3. 杭州市畜牧兽医局,浙江,杭州,310020 4. 浙江大学,动物科学学院,浙江,杭州,310029 |
| 基金项目： | 杭州市农业发展基金扶持项目 |
| 摘 要： | 设计扩增猪瘟病毒(swine fever virus,SFV)核酸5'端非翻译区的引物,采用RT-PCR方法克隆目的片段并插入PMD-18 simple T质粒,重组质粒转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取质粒经PCR和序列测定证实为阳性重组质粒,命名为pSF.将构建的pSF作为标准阳性模板进行荧光定量PCR(FQ-PCR)检测表明,此模板在-20℃保存6个月对结果无显著影响;对于1×109,1×107,1×105拷贝/2μl的pSF用FQ-PCR方法测定的Ct值最大变异系数分别为1.55%;使用该模板建立的定量范围为1×102～1×1011拷贝/2μl;构建的阳性重组质粒pSF具有良好的稳定性和特异性.该方法可以用于临床诊断. |
| 关 键 词： | 猪瘟病毒 荧光定量PCR 重组质粒 |
Construction of standard positive template of the fluorescent quantitative PCR assay for detection of swine fever virus |
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| LU Yong-gan,DAI Xian-jun,YAO Jian-hong,HUANG Li-quan.Construction of standard positive template of the fluorescent quantitative PCR assay for detection of swine fever virus[J].Acta Agriculturae Zhejiangensis,2009,21(1). | |
| Authors: | LU Yong-gan DAI Xian-jun YAO Jian-hong HUANG Li-quan |
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| Keywords: | |
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