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| PRRSV浙江株ORF5基因的原核表达与免疫原性分析 | |
| 引用本文： | 牛登元,王一成,袁秀芳,徐丽华,刘邓,伏小平.PRRSV浙江株ORF5基因的原核表达与免疫原性分析[J].浙江农业学报,2009,21(2). |
| 作者姓名： | 牛登元 王一成 袁秀芳 徐丽华 刘邓 伏小平 |
| 作者单位： | 1. 甘肃农业大学,动物医学院,甘肃,兰州,730070;浙江省农业科学院,畜牧兽医研究所,310021,浙江,杭州 2. 浙江省农业科学院,畜牧兽医研究所,310021,浙江,杭州 3. 新疆农业大学,动物医学院,新疆,乌鲁木齐,830052 4. 甘肃农业大学,动物医学院,甘肃,兰州,730070 |
| 摘 要： | 根据GenBank中公布的PRRSV基因序列(EU709837),设计一对PCR引物,以浙江分离株为模板,通过RT-PCR扩增出ORF5基因全序列.以PCR技术构建了缺失信号肽及三处跨膜区的重组ORF5基因,命名为g-ORF5.将g-ORF5基因定向克隆到原核表达载体pET-28a中,转化入E.coli菌株BL21.经酶切和测序鉴定后,阳性菌株用1 mol/L IPTG诱导表达,用Ni-NTA纯化表达的重组蛋白.结果表明,重组GP5蛋白在大肠杆菌中获得表达.纯化后经ELISA和Dot-ELISA分析,表达蛋白具有免疫反应性,能与PRRSV阳性猪血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应. |
| 关 键 词： | 猪的生殖与呼吸系统综合征 原核表达 |
Prokaryotic expression of ORF5 of PRRSV and analysis of its immunogenicity |
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| NIU Deng-yuan,WANG Yi-cheng,YUAN Xiu-fang,XU Li-hua,LIU Deng,FU Xiao-ping.Prokaryotic expression of ORF5 of PRRSV and analysis of its immunogenicity[J].Acta Agriculturae Zhejiangensis,2009,21(2). | |
| Authors: | NIU Deng-yuan WANG Yi-cheng YUAN Xiu-fang XU Li-hua LIU Deng FU Xiao-ping |
| Abstract: | |
| Keywords: | ORF5 |
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