| 人血管紧张素Ⅱ2型受体AT2R重组细胞系的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 陈惠莹,毛莹莹,裴娜娜,颜仁和,万鹏飞,李红卫.人血管紧张素Ⅱ2型受体AT2R重组细胞系的构建与鉴定[J].暨南大学学报,2019,40(3). |
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| 作者姓名： | 陈惠莹 毛莹莹 裴娜娜 颜仁和 万鹏飞 李红卫 |
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| 作者单位： | 南方医科大学检验与生物技术学院,广东广州,510515;暨南大学附属第一医院病理科,广东广州,510163;广州伯尼兹生物科技有限公司,广东广州,510663 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;广东省医学科学技术研究项目;中国博士后科学基金面上项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建人血管紧张素Ⅱ2型受体(hAT2R)过表达稳定细胞系,探讨AT2R激动剂Compound 21等对前列腺癌细胞的作用及机制.方法:构建含hAT2R基因的慢病毒表达载体pLV-CMV-hAT2R-IRES-eGFP并包装成慢病毒.将重组慢病毒载体pLV-CMV-IRES-eGFP-hAT2R感染前列腺癌细胞,并利用流式细胞术筛选出单克隆细胞株,RT-PCR及Western blot方法检测重组细胞系中hAT2R表达水平,使用AT2R激动剂CGP42112检测受体功能.结果:重组慢病毒载体感染PC-3、DU145前列腺癌细胞24 h后均能观察到eGFP表达,用流式细胞术分别筛选出单克隆细胞株,RT-PCR及Western blot检测结果显示目的基因hAT2R在两株重组细胞系中表达显著升高,CGP42112处理24 h后,重组细胞系细胞活力较正常PC-3、DU145细胞显著降低.结论:成功构建hAT2R过表达稳定细胞系.
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| 关 键 词： | hAT2R Compound 21 慢病毒 稳定细胞系 前列腺癌 |
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