山新杨转Bt+蜘蛛杀虫肽基因的分析 |
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引用本文: | 左丽丽,王志英,梁臣,谢淑萍.山新杨转Bt+蜘蛛杀虫肽基因的分析[J].东北林业大学学报,2009,37(7). |
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作者姓名: | 左丽丽 王志英 梁臣 谢淑萍 |
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作者单位: | 1. 东北林业大学,哈尔滨,150040 2. 黑龙江省鸡西市林业局 3. 黑龙江省海林市林业局 |
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基金项目: | 黑龙江省科技攻关项目,黑龙江省重点基金项目 |
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摘 要: | 以山新杨(Populus davidiana Dode × P.bollena Lauche)为受体材料,在筛选遗传转化条件的基础上,利用农杆菌介导叶盘转化法进行了Bt+蜘蛛杀虫肽基因转化研究.结果表明:在叶片转化时,卡那霉素的临界质量浓度为10 mg/L;生根筛选培养时卡那霉素的临界质量浓度为15 mg/L;利用质量浓度为600 mg/L的头孢噻肟钠脱菌,对叶片生长和不定芽形成影响不大.山新杨遗传转化的工程菌菌液浓度以0.1~0.2(OD600)为最佳,其叶片分化率为73%~77%、抗性芽率为20%~23%;浸染时间以2~5 min为宜,其叶片分化率和抗性芽率最高.在共培养基中加入200 μmol/L的乙酰丁香酮,其叶片分化率和抗性芽率分别比对照提高1.43倍和2.61倍.对转化植株的PCR检测结果呈阳性,初步证明外源基因Bt+蜘蛛杀虫肽导入并整合进了山新杨基因组.
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关 键 词: | 山新杨 Bt+蜘蛛杀虫肽基因 遗传转化 |
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