桂花OfWRKY120基因鉴定及盐胁迫响应功能研究

【目的】根据前期基因家族鉴定分析得到OfWRKY120，对该基因盐胁迫响应的功能进行分析，为桂花盐胁迫下的调控机制研究奠定基础。【方法】利用生物信息学方法对OfWRKY120保守结构域、系统进化进行分析，并采用qRT-PCR技术研究盐胁迫下OfWRKY120在桂花叶片中的相对表达量。构建OfWRKY120超表达载体，使用亚细胞定位、酵母自激活检测等探究其特性，将该基因瞬时转化本氏烟草后，对烟草进行盐处理，利用DAB、NBT染色和相关生理指标的测定，解析瞬时转化OfWRKY120对本氏烟草耐盐性的影响。【结果】OfWRKY120基因全长为1 422 bp，编码474个氨基酸，存在WRKY superfamily保守结构域。盐胁迫能够激活桂花叶片中OfWRKY120的表达，在72 h时相对表达量最高，与对照有显著差异。亚细胞定位结果表明，OfWRKY120定位于细胞核。酵母自激活结果显示OfWRKY120无自激活活性。盐胁迫后，OfWRKY120瞬时过表达植株的超氧阴离子(O^-₂·)和脯氨酸含量显著高于空载对照，且DAB和NBT染色表现出更深的颜色。本氏烟草中的qRT-PCR结果显示，OfWRKY120显著降低了NbCAT的表达，而显著提高了NbP5CS1、NbP5CS2和NbP5CR的表达。【结论】OfWRKY120过表达增加了盐胁迫下本氏烟草中活性氧（ROS）的含量，导致植物对盐胁迫的敏感性提高。

Identification and salt stress response of OfWRKY120 gene in Osmanthus fragrans