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RP-HPLC法检测发酵液中赤霉素GA4,GA7的含量
引用本文:李佼佼,曹峥,开玉美,杨文革,钱永根,胡永红.RP-HPLC法检测发酵液中赤霉素GA4,GA7的含量[J].分析试验室,2013(11):9-12.
作者姓名:李佼佼  曹峥  开玉美  杨文革  钱永根  胡永红
作者单位:南京工业大学;江苏丰源生物工程有限公司
基金项目:江苏省高校自然科学研究(重大项目)(12KJA180002);高校科研成果产业推进项目(JHB2011-16);江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(12)3060、CX(12)3063)资助
摘    要:建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定发酵液中赤霉素GA4,GA7的方法。探讨了流动相缓冲盐与甲醇的比例、缓冲盐pH、温度、流速等对两种赤霉素分离的影响,结果表明在Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱下,以V(甲醇):V(pH3.0,0.05 mol/L KH2PO4)=60:40为流动相,柱温35℃,流速1.0 mL/min,检测波长228nm,进样量20μL,分离度良好。GA4,GA7标准品质量浓度分别在0.1~8.0 mg/mL,0.1~3.0 mg/mL范围内线性关系良好,线性回归方程为Y4=1.58878+7.06978X4,Y7=0.48281+7.12931X7;GA4,GA7检出限分别为19.6,14.3μg/mL,平均加标回收率分别为98.8%,99.9%,相对标准偏差RSD分别为1.5%,0.34%。

关 键 词:赤霉素GA4  GA7  反相高效液相色谱法  发酵液  含量测定
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