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焦磷酸测序技术快速测定肾移植受体人群CYP3A5*3基因多态性方法的建立
引用本文:朱利军,李定云,李智,叶启发,王果,明英姿,成柯,赵于军,佘兴国,周宏灏. 焦磷酸测序技术快速测定肾移植受体人群CYP3A5*3基因多态性方法的建立[J]. 中国现代医学杂志, 2010, 20(15)
作者姓名:朱利军  李定云  李智  叶启发  王果  明英姿  成柯  赵于军  佘兴国  周宏灏
作者单位:1. 中南大学湘雅三医院(卫生部移植医学工程技术研究中心),湖南,长沙,410013
2. 中南大学临床药理研究所,湖南,长沙,410013
摘    要:目的 建立基于焦磷酸测序技术(Pyrosequencing)肾移植受体CYP3A5*3基因多态性的简单、快速、准确、高通量的检测方法.方法 提取221例肾移植受体和200例健康人外周血基因组DNA,应用PyroMark ID焦磷酸测序仪进行焦磷酸测序,采用Sanger法DNA测序作为标准对照,观察分析焦磷酸测序法的可靠性,并分析肾移植受体人群CYP3A5*3多态性的分布.结果 建立了基于焦磷酸测序技术的CYP3AS*3基因多态性检测新方法,实现了DNA标本的快速、可靠、高通量检测,经重复性检测和Sanger标准法DNA测序可靠性检测,用焦磷酸测序技术检测CYP3A5*3多态性的突变检出率及重复率均达100%.221例肾移植受体CYP3AS*3基因型分布:*1/*1型为23例(10.4%),*1/*3型为89例(40.3%),*3/*3型为109例(49.3%),与正常人群比较等位基因分布符合Hardy-Weinberg平衡.结论 与传统的测序方法相比,焦磷酸测序法能够简单、快速、准确地测定肾移植受体CYP3A5*3基因型,适合临床推广应用.

关 键 词:焦磷酸法测序  CYP3A5*3多态性  肾移植

Rapid determination of CYP3A5*3 polymorphism in renal transplantation recipients by pyrosequencingTM
ZHU Li-jun , LI Ding-yun , LI Zhi , YE Qi-fa , WANG Guo , MING Ying-zi , CHENG Ke , ZHAO Yu-jun , SHE Xing-guo , ZHOU Hong-hao. Rapid determination of CYP3A5*3 polymorphism in renal transplantation recipients by pyrosequencingTM[J]. China Journal of Modern Medicine, 2010, 20(15)
Authors:ZHU Li-jun    LI Ding-yun    LI Zhi    YE Qi-fa    WANG Guo    MING Ying-zi    CHENG Ke    ZHAO Yu-jun    SHE Xing-guo    ZHOU Hong-hao
Abstract:
Keywords:
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