| 摘 要： | 目的:探索双波长弱激光(Low level laser therapy,LLLT)增强干细胞活力的机制及其在脊髓损伤方面的应用,为双波长激光的临床治疗和推广提供理论依据。方法:体外培养人脐带间充质干细胞和人成纤维细胞,采用635/808 nm双波长半导体激光器,光剂量为功率密度20 m W/cm2;能量密度0～24 J/cm2,分别检测细胞增殖活力、活性氧产量、抗氧化酶活性、脂质氧化能力以及细胞生长因子和相关蛋白表达量。建立大鼠脊髓损伤模型,LLLT联合干细胞移植对其进行治疗,对模型鼠进行行为学评价,取材脊髓组织进行组织病理学评价以及采用DTI技术追踪脊髓神经纤维。结果:(1)635 nm和双波长LLLT作用后h UCMSCs增殖速度明显大于对照组;LLLT促进ROS低水平表达;CAT、SOD和t GPx酶活力提高;808 nm弱激光促进MDA增加;LLLT使IL-1、IL-6和NFκB分泌量显著增多,其中双波长效果最好。(2)LLLT联合h UCMSCs促进大鼠脊髓损伤部位的神经恢复,行为学评分高于对照组;NF-200和GFAP的表达量增加;尼氏小体染色变深、数量变多;DTI结果显示对照组神经纤维断裂,治疗组损伤处纤维束相互交错。单纯的LLLT组是最晚出现大鼠死亡和死亡率最低的一组。结论:LLLT诱导产生的低水平氧化应激反应可促进细胞的增殖,提升细胞抗氧化酶活力,增强细胞对外界环境的抵抗能力。LLLT联合干细胞促进受损神经纤维的再生与功能修复。红光或近红外光对细胞的刺激效应不同,双波长激光能联合两种波长激光的生物效应,对干细胞移植治疗脊髓损伤有更好的疗效。
|
