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枯草芽孢杆菌ATCC21216腺苷磷酸化酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
引用本文:全敏,高淑红,陈长华.枯草芽孢杆菌ATCC21216腺苷磷酸化酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].华东理工大学学报(自然科学版),2007,33(1):33-36.
作者姓名:全敏  高淑红  陈长华
作者单位:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237
摘    要:聚合酶链式反应(PCR)扩增枯草芽孢杆菌ATCC21216(His-)编码腺苷磷酸化酶的基因deoD(0.7 kb),测序表明与枯草芽孢杆菌168的deoD同源性为98.7%。将此基因插入质粒pET28a( )(5.3 kb)中,重组质粒pETdeoD在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了表达,表达量占总蛋白的27%。以HPLC方法测定腺苷磷酸化酶的比酶活为每毫克蛋白0.151 U。

关 键 词:腺苷磷酸化酶  deoD  基因克隆  蛋白表达  大肠杆菌
文章编号:1006-3080(2007)01-0033-04
收稿时间:2006-03-29
修稿时间:2006年3月29日

Cloning and Expression of Bacillus subtilis ATCC21216 Adenosine Phosphorylase Gene in Escherichia coli
QUAN Min,GAO Shu-hong,CHEN Chang-hua.Cloning and Expression of Bacillus subtilis ATCC21216 Adenosine Phosphorylase Gene in Escherichia coli[J].Journal of East China University of Science and Technology,2007,33(1):33-36.
Authors:QUAN Min  GAO Shu-hong  CHEN Chang-hua
Abstract:The gene deoD(0.7 kb) of B.subtilis ATCC21216 encoding an adenosine phosphorylase was amplified by polymerase chain reaction(PCR).Results of sequencing showed 98.7% similarity to the same gene of B.subtilis 168.Based on DNA recombinant techniques,the gene deoD was cloned into plasmid pET28a( )(5.3 kb) to generate highly effective E.coli BL21(DE3) strain producing adenosine phosphorylase.Expression of the recombinant protein was 27% of the total protein.Specific activity of the(enzyme) in crude extract determined by high performance liquid chromatography was 0.151 U/mg protein.
Keywords:adenosine phosphorylase  deoD  gene cloning  protein expression  E  coli
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