| HCV中和抗原表位与HBV S抗原嵌合病毒样颗粒的制备及纯化 |
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| 引用本文： | 舒放,王晓岩,雷迎峰,林芳,王希,李斌,刘冲,张惠中,韦三华.HCV中和抗原表位与HBV S抗原嵌合病毒样颗粒的制备及纯化[J].粉末涂料与涂装,2015(3):257-260,265. |
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| 作者姓名： | 舒放 王晓岩 雷迎峰 林芳 王希 李斌 刘冲 张惠中 韦三华 |
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| 作者单位： | 第四军医大学唐都医院临床实验与检验输血科;第四军医大学基础部微生物学教研室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81072500) |
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| 摘 要： | 目的制备丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)中和抗原表位与HBV S抗原嵌合病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),并进行纯化和鉴定。方法采用脂质体法分别将4个HCV中和抗原表位与HBV S抗原嵌合重组表达载体p CI-HBSE1、p CI-HBSE2、p CI-HBSE3、p CI-HBSE4转染HEK293T细胞,48 h后收集培养上清,获得自我装配的嵌合HCV中和表位的HBV VLPs,分别命名为VLPs-SE1、VLPs-SE2、VLPs-SE3、VLPs-SE4,蔗糖密度梯度离心,透析浓缩后,电镜观察VLPs,电化学发光法进行HBs Ag定量,ELISA法检测嵌合VLPs作为包被抗原与HCV感染患者血清的反应。结果电镜观察可见4种嵌合VLPs,大小约为22 nm;浓度最高的VLPs-SE2 HBs Ag含量达5.51×103ng/ml,该浓度可满足后续试验的要求;用混合VLPs作为包被抗原检测的HCV感染患者血清中和抗体水平稍高于单一VLPs作为包被抗原检测的水平。结论成功制备了HCV中和抗原表位与HBV S抗原嵌合VLPs,为进一步评价VLPs体内诱导的中和抗体及中和抗体的保护作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 中和抗原表位 乙型肝炎病毒 S抗原 嵌合 病毒样颗粒 |
Preparation and purification of chimeric virus-like particles of HCV neutralizing epitopes and HBV S antigen |
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| SHU Fang;WANG Xiao-yan;LEI Ying-feng;LIN Fang;WANG Xi;LI Bin;LIU Chong;ZHANG Hui-zhong;WEI San-hua.Preparation and purification of chimeric virus-like particles of HCV neutralizing epitopes and HBV S antigen[J].Chinese Journal of Biologicals,2015(3):257-260,265. |
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| Authors: | SHU Fang;WANG Xiao-yan;LEI Ying-feng;LIN Fang;WANG Xi;LI Bin;LIU Chong;ZHANG Hui-zhong;WEI San-hua |
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| Affiliation: | SHU Fang;WANG Xiao-yan;LEI Ying-feng;LIN Fang;WANG Xi;LI Bin;LIU Chong;ZHANG Hui-zhong;WEI San-hua;Department of Clinical Laboratory Medicine, Tangdu Hospital, Fourth Military Medical University; |
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