不同培养基对蝉花培养物核苷类成分的影响

目的 建立高效液相色谱（HPLC）法同时检测蝉花培养物4种核苷类成分，分析不同斜面培养基及固体培养基对4种核苷类成分的影响。方法 建立4种核酸类成分——尿苷、鸟苷、腺苷、N6-（2-羟乙基）腺苷的HPLC检测方法，应用Waters Symmetry shield TMRP C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；流动相为水-甲醇，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min；柱温30℃；进样量10 μL；检测波长260 nm；外标法测定4种核苷类成分水平。对包括假单胞菌选择培养基（PSA）、沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDAY，1 000 mL中含葡萄糖量分别为20、30、40 g）在内的斜面培养基和包括江苏农垦（SCM）、烟农24（YN-24）、烟农15（YN-15）、济麦22（JM-22）在内的固体培养基培养的蝉花培养物中4种核酸类成分水平进行测定，利用SPSS16.0统计软件对测定结果进行多重统计分析，验证并找出引起差异的原因。结果 建立的HPLC法，4种核苷类成分分离度良好，精密度、稳定性、重复性、加样回收率、耐用性均符合要求；4种不同的斜面培养基对尿苷成分基本无影响（P>0.05），PSA对腺苷、鸟苷、N6-（2-羟乙基）腺苷的水平有明显促进作用（P<0.05）；固体培养基SCM的4种核苷类成分的水平较高。结论 培养基种类对蝉花培养物核苷类成分变化有直接的影响，确定蝉花虫草的生产工艺时，应充分考虑培养基的选择，同时结合产品成分和生产成本等因素进行综合评价。

Effect of different culture medium on nucleoside component content in culture of Cordyceps cicadae