基因工程改造鼠源性抗人脑胶质瘤单克隆抗体的初步报告

为了提高人脑胶质瘤导向诊治中单抗载体的临床实用价值，必须把鼠源性大分子单抗改造成人源化、小分子单抗。采用ＲＴ－ＰＣＲ法，从人脑胶质瘤单抗杂交瘤细胞系ＳＺ３９中克隆出３４８ｂｐ的重链可变区（ＶＨ）和３１８ｂｐ的轻链可变区（ＶＬ）ｃＤＮＡ片断。又采用重组ＤＮＡ技术，将ＶＨ和ＶＬ与人免疫球蛋白ＩｇＧ１重链ＣＨ１和轻链κ恒定区基因拼接，或将ＶＨ和ＶＬ以通用Ｌｉｎｋｅｒ直接连接，分别构建表达载体ｐＨＥＮ１－ＳＺ３９Ｆａｂ／Ｈｕ（嵌合抗体）和ｐＨＥＮ１－ＳＺ３９ＳｃＦｖ（单链抗体）。而后将此二载体转染至非抑制性大肠杆菌ＨＢ２１５１中表达。结果表明，两者的表达产物均为可溶性，以ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔ－ｅｒｎｂｌｏｔ法检测，均与人脑胶质瘤体外细胞系ＳＨＧ４４细胞膜表面抗原发生特异结合，与亲本抗体ＳＺ３９特异识别１８００００膜抗原的条带相一致。该结果显示，基因工程改造的人源化、小分子单抗为今后的临床应用展示了美好的前景。