对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及Bcl-2，Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达的影响

目的 研究对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2），Bcl-2相关X蛋白（Bax）和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（cleaved Caspase-3）蛋白表达的影响。方法 选择人肝癌SMMC-7721细胞，常规培养及传代，对叶百部总生物碱设置添加干预的质量浓度为50，75，112，167，250 mg·L^-1，另设置仅添加10%胎牛血清作为空白组。采用噻唑蓝（MTT）比色法和细胞克隆实验观察细胞增殖的作用，Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测3种凋亡相关蛋白Bcl-2，Bax和cleaved Caspase-3的表达。结果 对叶百部总生物碱可抑制SMMC-7721细胞增殖，与空白组比较，细胞增殖抑制率显著升高（P<0.01），作用24，48，72 h的50%细胞抑制浓度（IC₅₀）分别为（173.36±8.75），（112.14±16.50），（96.41±2.60） mg·L^-1，细胞集落形成抑制率显著升高（P<0.01），存在浓度依赖性。与空白组比较，对叶百部总生物碱可促进细胞凋亡，SMMC-7721细胞凋亡数目和凋亡率显著增加（P<0.01），在荧光正置显微镜下可观察到典型细胞凋亡形态，如亮蓝色细胞核染色，细胞质浓缩和细胞核固缩等。与空白组比较，抑凋亡蛋白Bcl-2表达显著下调（P<0.01）；与空白组比较，对叶百部总生物碱75，112，167，250 mg·L^-1促凋亡蛋白Bax，cleaved Caspase-3蛋白表达显著上调（P<0.01）。结论 对叶百部总生物碱有很好的抑制SMMC-7721细胞增殖和促进凋亡的作用，其机制可能与抑制Bcl-2蛋白表达和促进Bax，cleaved Caspase-3蛋白表达有关。