四逆散对抑郁大鼠BDNF/TrkB，5-HT/5-HT1AR及HPA轴的影响

目的 观察四逆散对抑郁大鼠脑神经营养因子（BDNF）/酪氨酸激酶受体B（TrkB）,5-羟色胺（5-HT）/5-HT1A受体（5-HT1AR）及下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴的影响,探讨四逆散基于BDNF/TrKB,5-HT/5-HT1AR及HPA轴的抗抑郁作用机制。方法 120只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、四逆散低、中、高剂量组和氟西汀组,每组20只。除正常组外,其余5组连续21 d采用孤养结合慢性温和不可预知性刺激法（CUMS）制备抑郁大鼠模型。四逆散低、中、高剂量组分别灌胃（ig）四逆散（1.25,2.5,5）g·kg^-1,氟西汀组ig盐酸氟西汀0.01 g·kg^-1,正常组和模型组ig等体积生理盐水,每日1次,持续干预21 d。干预期间,各造模组大鼠均继续给予刺激。通过糖水偏好和旷场实验评估CUMS模型大鼠抑郁状态;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血浆促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）,促肾上腺皮质激素（ACTH）,皮质酮（CORT）及海马匀浆中BDNF,5-HT水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测海马TrKB,5-HT1AR,糖皮质激素受体（GR）和盐皮质激素受体（MR）mRNA表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马TrKB,5-HT1AR,GR,MR蛋白表达水平;苏木素-伊红（HE）染色观察海马组织形态学变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠糖水偏好率显著下降（P<0.01）,旷场实验中水平得分和垂直得分显著降低（P<0.01）,血浆CRH,ACTH,CORT含量显著升高（P<0.01）,海马BDNF,5-HT含量显著降低（P<0.01）,海马TrKB,5-HT1AR和GR mRNA及蛋白表达水平显著降低（P<0.01）,MR mRNA及蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,HE染色结果显示海马神经元结构损伤。与模型组比较,四逆散低、中、高剂量组和氟西汀组糖水偏好率显著升高（P<0.01）,旷场实验中水平得分和垂直得分明显升高（P<0.05,P<0.01）,血浆CRH,ACTH,CORT含量明显降低（P<0.05,P<0.01）,海马BDNF,5-HT含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,海马TrKB,5-HT1AR和GR mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,MR mRNA及蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,HE染色结果显示海马神经元结构明显复原。结论 四逆散具有显著的抗抑郁作用,其机制可能与升高大鼠海马BDNF,5-HT含量,上调TrKB,5-HT1AR和GR mRNA及蛋白表达水平,下调MR mRNA及蛋白表达水平,抑制HPA轴亢进,增强海马组织神经元的再生和修复相关。