非洲猪瘟病毒CD2v蛋白胞内域与胞外域的原核表达及其抗原性分析 |
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引用本文: | 李艳蕊,任静,崔锦蔷,袁晨,王云霄,马亚娟,刘志昌,李永社,宋勤叶.非洲猪瘟病毒CD2v蛋白胞内域与胞外域的原核表达及其抗原性分析[J].中国畜牧兽医,2024(4):1660-1670. |
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作者姓名: | 李艳蕊 任静 崔锦蔷 袁晨 王云霄 马亚娟 刘志昌 李永社 宋勤叶 |
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作者单位: | 1. 河北农业大学动物医学院,河北省兽医生物技术创新中心;2. 保定市动物疫病预防控制中心 |
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基金项目: | 河北省重点研发计划项目“非洲猪瘟病原学与血清学快速检测技术的研究及应用”(21326613D); |
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摘 要: | 【目的】应用大肠杆菌表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)CD2v蛋白胞外域(N-端,CD2v-N)与胞内域(C-端,CD2v-C)并分析两者的抗原性,为ASFV检测方法的研发提供试验依据和指导。【方法】构建CD2v-N和CD2v-C的重组原核表达质粒,在体外表达并纯化CD2v-N和CD2v-C蛋白,通过Western blotting对表达蛋白进行鉴定;用表达的CD2v-N和CD2v-C蛋白分别肌内接种免疫新西兰大白兔,共免疫3次,每次间隔2周;每次免疫后14 d,应用ELISA方法测定CD2v-N或CD2v-C的特异性抗体水平;用纯化后的CD2V-N和CD2v-C蛋白作为包被抗原,通过ELISA方法检测95份ASFV感染猪的血清CD2v-N或CD2v-C特异性抗体,比较CD2v-N和CD2v-C在猪体内诱导的免疫反应水平。【结果】重组蛋白CD2v-N和CD2v-C分别以包涵体和可溶性形式表达,分子质量分别为22.9和34.0 ku,均能与猪抗ASFV血清特异性结合;用CD2v-N蛋白首免家兔后14 d,血清中未检测到特异性抗体,而...
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关 键 词: | 非洲猪瘟病毒(ASFV) CD2v蛋白 胞外域 胞内域 蛋白表达 抗原性 |
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