杜仲叶中氯原酸的提取分离研究

研究了杜仲叶中氯原酸的提取分离条件。结果表明：以水为溶剂，将杜仲叶粉末于40℃下以1：6的料液比浸提4次，每次30min，氯原酸的浸出率为（94．11±0．53）％（n=3）。水提液经浓缩及分离纯化得氯原酸提取物，得率为（4．11±0．11）％（n=3），纯度为（23．73±0．55）％。     

杜仲叶提取物对体外培养的成骨细胞代谢功能调节研究

目的：研究杜仲叶提取物对体外培养成骨细胞（Osteoblast OB)代谢功能的调节作用,从而进一步明确杜仲补肾,强筋健骨的作用机理以及筛选杜仲叶防治骨质疏松药效成分,方法：用杜仲叶三个提取部位（Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ）不同浓度对体外培养的成骨细胞作用,由新生SD大鼠头盖骺作原代培养,用传代的第一代细胞做药效试验,测定指标：（1）细胞增殖情况,用MTT计数法[1,2];（2）碱性磷酸酶（ALP）活性测定,对硝基磷酸盐法。结果：Ⅱ,Ⅲ提取部位对细胞增殖作用与对照组比较,P＜0．001,ALP的活性与对照组比较,三个部位均为P＜0．001,结论：表明Ⅱ,Ⅲ提取部位的10^-5mg/L浓度组具有明显的调节骨代谢功能的药效作用。     

杜仲叶绿原酸的提取及精制

对杜仲叶绿原酸的提取进行研究。方法 采用乙醇为溶剂，经正交实验方法对杜仲叶绿原酸的提取进行研究，并采用大孔树脂对其精制。结果 乙醇提取杜仲叶绿原酸的最佳工艺条件为：温度80℃．料液比1：10．乙醇浓度60％，提取时间2小时。所筛选的NKA-Ⅱ树脂是吸附绿原酸的理想吸附剂。结论 适宜于产业化生产。     

超声波技术辅助酶解法提取杜仲叶总黄酮工艺优化

目的 优化杜仲叶总黄酮的提取工艺.方法 以总黄酮提取率为指标,通过单因素试验和正交试验确定最佳工艺条件.结果 优化的最佳工艺条件为纤维素酶用量30 mg,料液比1:30(g:mL),酶解pH 5.0,酶解温度45℃,乙醇体积分数60％,超声温度50℃,超声时间25 min.结论 超声波技术辅助酶解法提取杜仲叶总黄酮的提...     

杜仲叶提取物诱导羊骨髓间充质干细胞成骨及抑制其成脂肪分化

节骨代谢功能的药效作用,可促进成骨细胞增殖和碱性磷酸酶分泌.目的:探讨杜仲叶提取物诱导羊骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的同时,是否具有抑制成脂肪分化的作用.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-02/10在南昌大学第二附属医院分子中心实验室完成.材料:健康12月龄羊6只,由南昌大学提供.杜仲叶提取物由江两师大生物技术公司制备.方法:采用全骨髓法体外分离培养羊骨髓间充质干细胞,取第3代细胞,设立6组;空白对照组,加入DMEM+胎牛血清;传统成骨诱导剂组,加入含地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸的DMEM高糖培养基;传统成骨诱导剂+杜仲叶提取物组,在传统诱导剂组基础上加入10-5g/mL杜仲叶提取物;10-4,10-5,10-6g,mL杜仲叶提取物组分别加入对应质量浓度的杜仲叶提取物.同时另取第3代细胞行成脂肪诱导,分组同上,仅将传统成骨诱导剂更换为传统成脂诱导剂.主要观察指标:成骨诱导后,钙钻法检测碱性磷酸酶活性,Yon Kossa法观察矿化结节的形成,RT-PCR法检测成骨细胞中Cbfal mRNA基因的表达:成脂诱导后,油红O染色观察骨髓间充质干细胞成脂分化情况.结果:与窄白对照组比较,各成骨诱导组细胞内碱性磷酸酶合成增多,形成矿化结节,且传统成骨诱导剂+杜仲叶提取物组、10-4,10-5g/mL杜仲叶提取物组诱导成骨情况优于传统成骨诱导剂组、10-6g/mL杜仲叶提取物组;RT-PCR显示各成骨诱导组均能高效扩增出171 bp的Cbfa1基因转录片段,且成骨细胞中Cbfa1 mRNA表达水平差异无显著性意义(P＞0.05).油红O染色结果显示,加入杜仲叶提取物的各成脂诱导组,其脂滴数量明显少于传统成脂诱导剂组.结论:杜仲叶提取物能诱导体外分离纯化培养的羊骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化增殖,同时抑制其向脂肪细胞分化,实现双向调节作用.     

重庆市不同产地杜仲叶中绿原酸量的研究

目的 探讨重庆产杜仲叶的质量及产地差异,为杜仲叶的药用提供科学依据。方法 采用PLATISIL ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.2%磷酸(30∶70)为流动相,327 nm为检测波长,测定并比较杜仲叶、皮中绿原酸的量。结果 (1)重庆市6区县杜仲叶绿原酸量差异非常显著(P＜0.01),平均质量分数为(8.95±0.499) mg/g,其中,南川、城口两地杜仲叶绿原酸的量极显著高于万州、荣昌、武隆、长寿产(P＜0.01),武隆与长寿间差异不显著(P＞0.01);(2)重庆市不同产地同树龄同树株杜仲叶绿原酸的量极显著高于杜仲皮,叶绿原酸的量高达(10.150±0.260) mg/g;(3)杜仲叶绿原酸的量与树龄呈负相关。结论 杜仲叶绿原酸量因产地、树龄差异极大,杜仲叶可代替杜仲皮入药,其经济效益显著,杜仲叶值得开发利用。     

杜仲叶黄酮对糖尿病大鼠的血糖控制及对胰岛细胞的保护作用

目的:探讨杜仲叶黄酮对糖尿病大鼠血糖控制及对胰岛细胞的保护作用。方法:链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型,模型大鼠分为4组,即模型组、阳性药物组(格列本脲,10 mg·kg-1)、杜仲叶黄酮(2.5,5.0 g·kg-1)组,并设立正常组。ig给药,每日1次,连续28 d.取血测定大鼠空腹血糖(FBG),游离胰岛素(FINS)水平,并行口服葡萄糖耐量试验(OGTT);部分胰组织制备组织匀浆后测定超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)的含量;部分胰胰腺组织制作病理切片及HE染色,镜下观察胰岛形态及细胞数。结果:与正常组比较,模型组大鼠的FBG显著升高,FINS下降,糖耐量降低,胰腺组织中的SOD及GSH-Px水平降低,MDA水平升高,病理切片显示胰岛明显发生萎缩(P0.01);与模型组比较,杜仲叶黄酮能明显降低糖尿病大鼠胰腺组织中MDA水平、提高SOD及GSH-Px水平,并能降低大鼠的FBG,改善糖耐量,提高FINS水平(P0.01,P0.05),病理切片显示大鼠的胰岛面积增加、细胞数明显增多(P0.01,P0.05)。结论:杜仲叶黄酮可明显降低糖尿病大鼠的血糖,改善糖耐量,增加FINS水平,对胰岛细胞具有保护作用,推测降低氧化应激反应是其机制之一。     

复方杜仲胶囊的研制

目的 从资源可持续利用的角度出发,对杜仲进行开发利用.方法 以杜仲叶为主原料,辅以虫草及其它成分进行研究.结果 经科学配方和精心提取,研制成功了复方杜仲胶囊.结论 该产品具有明显的降血脂等功效.     

杜仲叶口腔崩解片的研制

目的优选杜仲叶提取工艺、辅料配比,制备杜仲叶口腔崩解片。方法采用单因素法确定杜仲叶的提取工艺;以明胶、甘露醇为矫味载体材料,采用研磨法与杜仲叶提取物混合;以微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮为崩解剂;采用直接压片法制片。结果确定了杜仲叶口腔崩解片的最佳矫味剂和崩解剂的配伍比例。结论制备工艺合理可行。     

大孔吸附树脂对杜仲叶中绿原酸吸附性能的研究

绿原酸（Chlorogenic acid）是我国传统名贵中药杜仲的主要活性成分之一，是植物在有氧呼吸过程中形成的一种苯丙素类物质，具有利胆、抗菌、抗病毒、降压、增高白细胞及兴奋中枢神经系统等多种药理作用，是保健品、食品、药品、化妆品等重要原料。目前我国提取绿原酸多以金银花为原料，其绿原酸提取成本高。近年的研究表明，