新生大鼠原代小胶质细胞分离培养方法的改良

目的研究改良体外小胶质细胞分离培养的方法及效果。传统法存在动物用量大、成本高且细胞培养时间长等局限。方法结合消化试剂组合和手摇震荡法培养分离小胶质细胞;同时采用Iba-1免疫荧光法进行细胞鉴定和纯度分析,台盼蓝染料法进行活力检测以及脂多糖刺激比较不同状态的小胶质细胞。结果改良法可在4 d内稳定获得小胶质细胞 1. 0×10~6个/60 mm培养皿,纯度≥98%,活力 98%,较传统法在动物用量、总成本和培养时间分别减少了2、3. 2、1. 5倍。结论改良法可减少动物用量、降低成本,缩短细胞培养时间;为研究小胶质细胞的生物学功能和中枢神经系统疾病机制建立了一种稳定、简便、高效的细胞模型。     

采用UPLC-MS/MS法研究树豆酮酸A在不同种属肝微粒体中的代谢差异

建立测定肝微粒体孵育体系中树豆酮酸A(CAA)质量浓度的方法,并比较其在不同种属肝微粒体中的代谢特征。方法:分别将CAA溶解于由还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)启动的大鼠、比格犬、人肝微粒体孵育体系中,置于37℃水浴中进行孵育,分别于孵育的0、5、10、15、30、45、60 min时用乙腈终止反应,以染料木素为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测各孵育体系中CAA的质量浓度。色谱柱为Waters BEH C_(18),流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸)(45∶55,V/V),流速为0.25 mL/min,柱温为30℃,进样量为2μL;采用电喷雾离子源,以选择反应监测模式进行负离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 353.14→309.11(CAA)、m/z 269.86→224.11(内标)。以孵育0 min时CAA的质量浓度为参照,计算其在不同孵育体系中的剩余百分比和酶动力学参数。结果:CAA检测质量浓度的线性范围为0.05～20μg/mL,定量下限为0.05μg/mL,最低检测限为0.01μg/mL;日内、日间RSD均小于10%,相对误差为-4.83%～8.94%,提取方法和基质效应均不影响待测物的测定。孵育60 min时,CAA在大鼠、比格犬、人肝微粒体中的剩余百分比分别为(62.79±9.99)%、(64.07±11.59)%、(96.66±5.71)%;在大鼠、比格犬肝微粒体中的半衰期(72.19、68.61 min)均显著短于人肝微粒体(364.74 min),清除率[0.019 2、0.020 2 mL/(min·mg)]均显著高于人肝微粒体[0.003 8 mL/(min·mg)](P<0.05)。结论:本研究建立的UPLC-MS/MS法简便、快速、专属性强、灵敏度高,可用于肝微粒体孵育体系中CAA质量浓度的测定及体外代谢稳定性的研究。CAA在大鼠、比格犬肝微粒体中的代谢稳定性均差于人肝微粒体。     

幼鼠内耳单个器官培养步骤及分类方法

内耳离体培养在研究内耳细胞功能、内耳组织发育再生、细胞损伤退化等方面具有重要价值。但由于内耳的组织结构微小复杂,其取材和培养具有较大难度,使该技术的普及和应用受到一定限制。本文在简要点评不同内耳离体培养方法优劣的基础上,结合本实验室多年来积累的实践经验,详细介绍了新生大鼠各个内耳终器取材及培养的具体步骤。从解剖迷路到分离终器,从凝胶制备到标本铺放,都有详细的操作指南,本文还针对各环节中的技术动作和关键事项进行了具体探讨并配以指导图例,希望这些内容能够弥补以往文献中抽象简略的条款式步骤所造成的实验困难,为开展内耳器官培养研究的初学者提供一定的帮助。     

提高内科临床见习效果的体会

临床见习是临床医学教育的重要环节，是衔接基础理论与临床实习的桥梁，对培养医学生临床思维、临床意识、临床技能和适应社会的能力具有重要的作用。是医学生转变为医生的必由之路。因此抓紧此期教育，提高学生见习教学质量是培养优秀医学人才的关键。而内科系统内容繁多，见习时间相对较短，如何最大程度提高学生的学习兴趣，在有限的时间内学习更多的临床知识，关键在于合理安排课程，改进教学方法，发挥学生主观能动性，促进见习质量的提高。笔者结合临床见习带教的经历，浅谈带好内科临床见习课的体会。     

IL—1β诱导体外培养的猪甲状腺细胞凋亡的实验研究

本文研究白细胞介素-1β(IL-1β)诱导体外培养的猪甲状腺细胞凋亡的实验，旨在探讨细胞因子对甲状腺细胞凋亡的作用。实验运用了甲状腺细胞原代培养技术和吖橙橙染色从形态学上测定细胞凋亡的发生，结果表明经IL—1β诱导后体外培养的猪甲状腺细胞有明显的凋亡特征—凋亡小体。     

换位思考在临床护理带教中的应用

换位思考即指人们对各种事物或现象能从对方的角度去思考和理解。在临床护理带教中运用换位思考，以培养学生学习知识的能力，培养非智力品质和全面的专业知识为目的的教学已成为必然趋势。遵循培养目标与社会需求相结合，能力培养与素质教育相结合的原则，现将本人带教体会总结如下。     

浅谈实习护生的医疗安全教育

目前，由于我国护士培养课程设置中缺乏有关医疗安全方面的教学内容，因此，临床带教中补上这一课显得十分迫切，以使护生在实习之初即确立“病人第一”、“安全第一”的意识，养成良好的职业素质，为今后的安全行医打下扎实基础。     

老年科门诊护士的素质培养

中国已进入老龄化社会，老年科门诊患者已成为医疗机构的一组重要服务对象。了解老年患者的就诊特征、掌握老年科门诊患者的病理、生理特点、协助诊断，解除老年人群的生理、心理病痛，是一个十分重要的护理内容。     

体外射频治疗肛肠疾病1000例

我科应用沈阳新兴科技工程开发公司同日本东京技研株式会社研制的CDB一体外射频痔疮治疗机治疗血栓外痔、肛门湿疹、结肠炎和肛周脓肿1000例，效果满意，报告如下。 1临床资料 1．1一般资料本组男600例，女400例，年龄13～70岁；病史2天至21年，其中血栓外痔500例，肛门湿疹300例，结肠炎198例，脓肿2例。     

体外震波碎石术的护理

体外震波碎石创伤小、安全、疗效显著，患者易接受，被广泛应用予泌尿系结石的治疗。体外震波碎石是不同于外科手术，将体内泌尿系统结石粉碎后从尿中排出。体外震波碎石的基本原理是利用水中放电，通过液电效应作为强大的震源，当冲击波到达结石部位时，由于结石密度与水相差悬殊，声波阻抗不同，会产生折射和反射现象，能量急剧释放，在结石内部产生相当高的拉伸内应力。既超过结石拉伸极限强度（大于98kg／cm）即可把结石粉碎。现将体外震波碎石治疗的术前、术后的观察与护理总结如下。．