HSV-TK基因和IL-12基因治疗裸鼠鼻咽癌的实验研究

目的：研究腺病毒介导的KDR启动子-单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV—tk）系统（AdKDR—tk）联合白细胞介素12基因对裸鼠鼻咽癌的治疗作用．方法：建立鼻咽癌裸鼠模型,将36只成瘤鼠随机分成IL-12基因组、AdKDR—tk／GCV组、IL-12基因＋AdKDR—TK／GCV组和生理盐水／GCV组（对照组）,每组9只．采用瘤内注射分别给予相对应的重组腺病毒液及生理盐水,24h后重复注射1次．次日起连续10d每天ip GCV1次,100mg／kg．治疗结束后处死裸鼠,检测肿瘤质量、组织形态学变化及肿瘤微血管密度．结果：IL-12基因组裸鼠鼻咽癌瘤体质量（1．82±0．78）g及肿瘤微血管密度（15．54±3．46）个／mm^3和AdKDR—tk／GCV组[分别为（1．61±0．61）g,（10．69±4．12）＋／mm^3]与IL-12基因＋AdKDR—TK／GCV组[分别为（1．04±0．52）g,（6．53±1．61）个／mm^3]相比差异有显著性（P〈0．05）;IL-12基因组,AdKDR—tk／GCV组及IL-12基因＋AdKDR—TK／GCV组与生理盐水GCV组[分别为（2．52±1．18）g,（22．78±5．12）个／mm^3]比较也存在显著差异（P〈0．05）．结论：HSV-TK基因和IL-12基因治疗可抑制裸鼠鼻咽癌皮下移植瘤的生长,提高机体的抗肿瘤免疫应答,两者联合运用可产生协同效应,为鼻咽癌的治疗提供新的方法．     

单纯疱疹病毒性脑炎小鼠脑组织中IL-10的表达

目的通过检测白细胞介素10（IL-10）在单纯疱疹病毒性脑炎（HSE）小鼠脑组织中的表达,探讨IL-10在HSE发病中可能的免疫学机制。方法采用颅内接种法建立HSE小鼠模型。设置正常对照组、病毒感染组、阿昔洛韦组和地塞米松组。通过神经症状评分观察HSE小鼠的发病情况,应用免疫组化法测定各组小鼠脑组织中IL10的表达,并采用Pearson相关分析分析神经症状评分与IL-10表达的相关性。结果病毒感染组神经症状评分最高,生存率最低,阿昔洛韦组次之,地塞米松组神经症状评分最低,生存率最高（F=30．20,x^2=23．20,P〈0．05）。IL-10在HSE小鼠脑组织中的表达较正常对照组明显上调,病毒感染组较阿昔洛韦组增高,病毒感染组和阿昔洛韦组较地塞米松组增高（F-10．65,P〈0．05）。神经症状评分与IL-10的表达呈正相关（r=0．83,P〈0．05）。结论IL-10可能通过抑制小胶质细胞炎性因子的产生,减轻神经细胞损伤等介导宿主在HSE中的免疫应答作用。     

CMV,HSV和TOX感染与先天性心脏病的关系

目的：为了探讨巨细胞病毒（ＣＭＶ）、弓形体（ＴＯＸ）帮单纯疱疹病毒（ＨＶＳ）感染与先天性心脏病病因学的关系．方法：收集先天性心脏病心肌组织６６份,非先心病心肌组织３８份,采用ＰＣＲ技术进行病原基因的检测．结果：在６６例先心病心肌组织中检测到ＣＭＶ,ＨＳＶ,ＴＯＸ的阳性率分别为＃２６％,４％和１５％,而３８例对照组中阳性率分别为２１％,３％和３％,ＴＯＸ在两组中检测有显著性差异（Ｐ〈０．０５）．结论     

230例性病门诊患者单纯疱疹病毒检测结果分析

【目的】探讨性病门诊患者生殖器部位单纯疱疹病毒（HSV）感染情况。【方法】应用酶联免疫吸附试验（ELISA）对本院230例性病门诊患者生殖器部位皮损进行HSV和其他性病痛原体检测。【结果】在230例病例中,HSV阳性率为43．9％（101／230）,其中男性患者阳性率为50．0％（75／150）,80例女性患者阳性率为32．5％（26／80）,两者相比较,差异有显著性（P〈0．05）。不同临床标本中以水疱检出HSV阳性率最高为71．4％（65／91）。同时并发其他性病病原体阳性82例,阳性率35．7％（82／230）。【结论】男性HSV发生率高于女性,不同临床标本HSV检出阳性率不同,且常常发其他性病痛原体感染。     

转染HSV-tk骨髓基质干细胞旁观者效应机制的研究

目的:研究转染单纯疱疹病毒-胸苷激酶(HSV-tk)基因的骨髓基质干细胞(BMSCs)旁观者效应的机制。方法:培养BMSCs,扩增Ad-CMV-tk后转染骨髓基质干细胞(BMSCs/tk);应用Transwell培养板使BMSCs/tk与C6细胞不相互接触,观察旁观者效应;观察0.22μm滤膜过滤后的条件培养液对C6细胞的作用。建立大鼠脑荷瘤模型,移植BMSCs/tk后,测定其血清中IFN-γ的变化;免疫组化观察荷瘤大鼠肿瘤内部淋巴细胞浸润及微血管密度。结果:在混合培养实验中,BMSCs/HSV-tk诱导BM-SCs的凋亡率明显高于对C6的凋亡率,两者差异有统计学意义,q=8.214,P=0.032。应用Transwell培养板培养后,BMSCs/HSV-tk诱导BMSCs凋亡率明显降低。BMSCs/HSV-tk/G-CV培养上清液可明显诱导C6细胞凋亡,但将其用0.22μm的滤膜过滤后,诱导凋亡的作用消失。脑荷瘤大鼠移植BMSCs/HSV-tk后血清IFN-γ浓度明显增高,肿瘤组织内CD4 细胞数、CD8 细胞数明显增加,微血管密度降低。结论:BMSCs/HSV-tk通过诱导BMSCs细胞凋亡后释放的凋亡小体介导旁观者效应,并发挥免疫学调节机制,对C6细胞可产生明显的抑制作用。     

酵母多糖血凝实验检测单疱病毒性角膜炎患者红细胞免疫功能的临床应用

目的 探讨酵母多糖血凝实验在检测单疱病毒性角膜炎(HSK)患者红细胞免疫功能方面的临床应用价值.方法 应用酵母多糖血凝实验检测43例HSK患者(其中活动期15例,非活动期28例)的红细胞免疫功能.并以45例健康献血者为正常对照组.结果 HSK患者红细胞免疫黏附血凝阳性滴度显著低于健康者,差异有统计学意义(P＜0.05);而两组补体稀释滴度比较差异无统计学意义.结论 酵母多糖血凝实验可以检测HSK患者红细胞免疫功能,HSK患者红细胞免疫功能较健康者明显降低,该实验对HSK患者的疗效判断及愈后评估具有一定的参考价值.     

健康兔眼角膜移植术后植片衰竭与疱疹病毒感染的关系

目的：探讨移植术后植片衰竭（PGF）与疱疹病毒感染的关系。方法：建立兔角膜疱疹病毒潜伏感染模型,实验分为健康兔移植潜伏感染供体角膜(A组)和潜伏感染兔移植健康供体角膜(B组)两组,行单眼穿透性角膜移植,A组健康兔7眼移植潜伏感染供体角膜,B组潜伏感染兔7眼移植供体健康角膜,分别于术后3、5、7、14和28 d裂隙灯显微镜观察角膜,同时采集角膜拭子,应用多重PCR检测单纯疱疹病毒1型（HSV-1）、单纯疱疹病毒2型（HSV-2）、巨细胞病毒（CMV）和水痘带状疱疹病毒（VZV）核酸,以PCR阳性结果判定存在病毒感染。结果：A组2眼（2/7,28.6%）分别在术后5和28 d发生角膜PGF,多重PCR检测角膜拭子、角膜植片,受体角膜边缘及三叉神经节分别为HSV-1和VZV阳性,未检测到HSV-2和CMV;A组其余5眼（5/7,71.4%）和B组7眼（7/7,100%）角膜植片透明,角膜拭子多重PCR结果均为阴性。 结论：供体角膜疱疹病毒感染是引起穿透性角膜移植术后PGF的主要因素, 其中HSV-1和VZV更易感染兔角膜,潜伏感染的病毒可以因手术刺激被活化,感染复发引起PGF。     

HSV-2333株在Vero细胞中持续感染及增殖特性研究

[目的]探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）在非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）中感染及增殖的特性。【方法】将HSV-2接种于Vero细胞中培养和传代,制备电镜样品观察,于不同时间收获病毒液并测毒力,进行pH值、血清以及在Vero细胞传代、不同感染复数等不同培养条件的摸索。【结果】pH值、残留牛血清是HSV-2在Vero细胞培养的影响因素,最佳收毒时间为36-72h。在Vero细胞上培养病毒3-5代,病毒毒力较高。【结论】建立了HSV-2在Vero细胞上培养增殖的初步方法,为下一步建立HSV-2的潜伏与激发细胞模型打下基础。     

化学发光法与PCR法联合检测孕妇单纯疱疹病毒感染率分析

目的对化学发光法与聚合酶链反应(PCR)联合检测孕妇单纯疱疹病毒(HSV)的感染率进行分析,为临床诊断提供依据。方法采集该院孕期常规建卡的孕妇血清,用化学发光法检测血清HSV IgM与IgG抗体水平;对其中任一项结果阳性者取宫颈分泌物进行HSV DNA定性检测。结果HSV1DNA阳性率为0.5%(7/1 422),HSV2DNA阳性率为1.1%(16/1422)。HSV IgM和IgG同时阳性者HSV1DNA阳性率为0.4%(4/1 008),HSV2DNA阳性率为0.6%(6/1 008);仅HSV IgM阳性者HSV1DNA阳性率为0.8%(1/130),HSV2DNA阳性率为3.1%(4/130);仅HSV IgG阳性者HSV1DNA阳性率为0.7%(2/284),HSV2DNA阳性率为2.1%(6/284)。3种情况HSV抗体阳性者HSV1DNA阳性率比较差异无统计学意义(P0.05),而HSV2DNA阳性率比较差异有统计学意义(P0.05)。结论在孕期对HSV抗体进行常规检查,对抗体阳性者进行DNA检测,能提高诊断准确率。尽量做到早期筛查、早期发现、及早对孕妇进行治疗。     

直肠癌组织中EB病毒的原位杂交检测

目的探讨EB病毒（EBV）感染与人直肠癌发生的关系。方法采用原位分子杂交技术,对100例人直肠癌组织标本中EBV编码小分子RNA（EBER）进行检测。结果100例直肠癌标本中癌细胞EBER均为阴性,有1例直肠癌组织间质中浸润的淋巴细胞EBER阳性。结论EBV感染与直肠癌的发生无明显相关性。