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目的 :为了繁育和鉴定碱性鞘磷脂酶(Alkaline sphingomyelinase,alk-SMase)基因敲除小鼠,将引进的基因敲除小鼠进行饲养繁殖,杂合子、纯合子用于继续保种。方法:对其幼鼠剪尾提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定;取alkSMase表达组织做HE染色进行形态学比较。结果 :对引进小鼠已成功饲养和繁殖,并得到纯合alk-SMase基因缺失型小鼠。结论:正确的饲养、繁殖及基因鉴定方法对于基因敲除小鼠的获得和保种具有重要的意义。 相似文献
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目的：阐明碱性鞘磷脂酶(Alkaline sphingomyelinase, alk-SMase) 基因剔除小鼠的背景特征,为研究alk-SMase在结肠癌发生发展中的作用提供动物模型的实验数据。方法: 将野生型（WT, / ）、杂合子( /-)、纯合子（KO,-/-）alk-SMase基因剔除小鼠剪尾提取DNA,PCR法作基因型鉴定;取其肝肠组织进行HE染色、激光共聚焦分析以及质谱仪检测,观察和分析不同基因型鼠的表型特征。结果: 与WT和杂合子比较,KO鼠显示：外观和体重无明显区别;基因型鉴定出现一个条带,其分子量为247bp; 小肠粘膜明显增厚,但alk-SMase表达减弱;质谱分析显示在肠道和肝脏中的鞘磷脂含量增高,1-磷酸鞘氨醇含量增加,而神经酰胺含量降低。结论: alk-SMase KO鼠有明显特征,但其外观和体重与其他基因型比较没有明显区别,这为研究alk-SMase的生物功能提供了一个理想的动物模型。
【关键词】碱性鞘磷脂酶;基因剔除小鼠;基因型;表型 相似文献
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